一种基于硅胶基质的原生质体固定方法

摘要

本发明公开了一种原生质体的固定化方法。本发明所提供的原生质体固定化方法，包括如下步骤：（1）将原生质体进行海藻酸钙包埋，得到包被有所述原生质体的海藻酸钙珠；（2）利用硅胶基质通过硅胶溶胶-凝胶法将步骤（1）所得的海藻酸钙珠进行包埋，得到包埋后的硅胶凝胶；（3）将步骤（2）所得的硅胶凝胶置于可溶性柠檬酸盐溶液中，溶解所述硅胶凝胶中的海藻酸钙成分，得到硅胶包埋的原生质体。实验证明，利用本发明所提供的原生质体固定化方法得到的硅胶包被的原生质体，具有相对较强的活力。本发明的方法可用于固定病毒侵染的原生质体，从而观察病毒对植物生长的影响，也可以先将原生质体进行固定然后再导入病毒，研究病毒的侵染机理。

主权项

一种原生质体固定化方法，包括如下步骤：(1)将原生质体进行海藻酸钙包埋，得到包被有所述原生质体的海藻酸钙珠；(2)利用硅胶基质通过硅胶溶胶‑凝胶法将步骤(1)所得的海藻酸钙珠进行包埋，得到包埋后的硅胶凝胶；(3)将步骤(2)所得的硅胶凝胶置于柠檬酸钾溶液中，溶解所述硅胶凝胶中的海藻酸钙成分，得到硅胶包埋的原生质体；所述柠檬酸钾溶液的溶质为柠檬酸钾，溶剂为W1溶液，所述柠檬酸钾在所述柠檬酸钾溶液中的终浓度为1‑2.0g/100ml；所述W1溶液的溶质为甘露醇、2‑吗啉乙磺酸和KCl，溶剂为水，所述甘露醇在所述W1溶液中的终浓度为0.5M，所述2‑吗啉乙磺酸在所述W1溶液中的终浓度为4mM，所述KCl在所述W1溶液中的终浓度为20mM。