发明名称 |
一种针对蜱传病原的悬浮芯片多重非诊断性检测方法 |
摘要 |
本发明公开了一种针对蜱传病原的悬浮芯片多重非诊断性检测方法,具体为:1)根据PCR扩增区域内的核苷酸序列设计特异性检测引物,并提交GENEBANK检测引物的特异性,合成时将上游引物5’末端连接特异Tag,下游引物5’末端进行生物素标记;2)PCR反应结束后将反应产物分别与相应的编码微球杂交;3)微球上的Anti-Tag在一定的条件下特异的捕获PCR产物上的Tag序列;4)加入链霉亲和素-藻红蛋白与微球上捕获的PCR产物上的生物素结合,利用悬浮芯片LUMINEX系统进行检测,通过激发微球基质上的红色分类荧光和微球表面经特异性反应结合上的藻红蛋白,对待检测物进行定性和定量分析。本发明利用悬浮芯片系统作为平台,检测灵敏度高,特异性好,是一种高通量的检测方法。 |
申请公布号 |
CN103173567B |
申请公布日期 |
2015.01.14 |
申请号 |
CN201310102092.X |
申请日期 |
2013.03.27 |
申请人 |
中国检验检疫科学研究院 |
发明人 |
王静;杨宇;王旺;刘丽娟;刘键;赵婷婷;徐宝梁 |
分类号 |
C12Q1/70(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I;C12Q1/06(2006.01)I;C12Q1/04(2006.01)I;G01N21/64(2006.01)I |
主分类号 |
C12Q1/70(2006.01)I |
代理机构 |
北京中创阳光知识产权代理有限责任公司 11003 |
代理人 |
张飙 |
主权项 |
一种针对蜱传病原的悬浮芯片多重非诊断性检测方法,具体为:1)根据PCR扩增区域内的核苷酸序列设计特异性检测引物,并提交GENEBANK检测引物的特异性,合成时将上游引物5’末端连接特异Tag,下游引物5’末端进行生物素标记;2)PCR反应结束后将反应产物分别与相应的编码微球杂交;3)微球上的Anti‑Tag在一定的条件下特异的捕获PCR产物上的Tag序列;4)加入链霉亲和素-藻红蛋白与微球上捕获的PCR产物上的生物素结合,利用悬浮芯片LUMINEX系统进行检测,通过激发微球基质上的红色分类荧光和微球表面经特异性反应结合上的藻红蛋白,对待检测物进行定性和定量分析;其中,所涉及的引物序列为:<img file="FDA0000532365670000011.GIF" wi="1788" he="1723" /><img file="FDA0000532365670000021.GIF" wi="1788" he="430" /> |
地址 |
100123 北京市朝阳区高碑店北路甲3号 |