一种维甲酸诱导蛋白16N端多肽及其抗体的制备方法和应用

摘要

本发明涉及生物医学技术领域，本发明提供了一种维甲酸诱导蛋白16（RAI16）N端多肽，其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示，该多肽具有优异的亲水性结构、柔性区、抗原指数及表面概率结构。本发明还提供了RAI16N端多肽的抗体，及抗体的制备方法，本发明制备的抗RAI16N端多肽抗体效价高，特异性好，可与天然人RAI16分子发生特异结合反应。进一步地，本发明提供了RAI16N端多肽及其抗体在制备预防和治疗性急性淋巴细胞白血病、肺癌、肝癌等疫苗或诊断试剂盒中的应用。

主权项

一种维甲酸诱导蛋白16N端多肽的抗体，其特征在于，是将如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列免疫新西兰大白兔，获得抗维甲酸诱导蛋白16N端多肽的抗体，包括以下步骤：(A)RAI16多肽的合成：多肽自动合成仪合成并纯化如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列；(B)RAI16多肽与载体蛋白交联：RAI16多肽与载体蛋白—钥孔血蓝蛋白采用戊二醛连接法，然后用pH值为8.5的硼酸缓冲液透析8‑12小时，交联形成RAI16‑KLH；(C)制备兔抗RAI16N端多肽抗体：将乳化后的RAI16‑KLH在兔背部皮下注射，并反复加强免疫，直至抗体效价等于或高于1：64000；(D)收集、分离得到含有兔抗RAI16多肽抗体的血清，采用辛酸‑硫酸铵法纯化RAI16多肽抗体，即得到抗RAI16N端多肽抗体。