一种快速检测沙眼衣原体的实时荧光定量PCR检测试剂盒及应用

摘要

本发明公开了一种快速检测沙眼衣原体的实时荧光定量PCR检测试剂盒及应用，涉及一种沙眼衣原体基因定量检测技术。本发明由DNA裂解液、荧光定量PCR反应液、标准阳性品、阴性质控标准品组成。荧光定量PCR反应液含有正反向引物和荧光染料。本发明特异性好，灵敏度高，定量精确，能快速简便地检测沙眼衣原体的基因拷贝数，同时提供了一种沙眼衣原体细胞培养包涵体形成单位(IFU)计数与沙眼衣原体PCR检测基因拷贝数之间进行相互换算的方法。可应用本发明技术在分泌物等标本中进行沙眼衣原体基因定量检测，且弥补了以往只能计数细胞内包涵体而不能计数细胞外沙眼衣原体的空白，具有无创伤，简便、经济、快速的特点，尤其可以进行沙眼衣原体基因拷贝数与IFU计数之间的换算，客观定量，应用前景十分广泛。

主权项

一种快速定量检测沙眼衣原体的荧光定量PCR检测试剂盒，其特征在于：该试剂盒由DNA裂解液、荧光定量PCR反应液、标准阳性品、阴性质控标准品组成；荧光定量PCR反应液中有含有引物和荧光染料，引物分为正向引物和反向引物：SEQ IDNO：1、SEQ ID NO：2；SYBR Green I染料工作液；dNTPs；标准阳性品pET21a(+)/MOMP重组质粒是含有沙眼衣原体基因组中ompA基因的重组质粒，该重组质粒可以在大肠杆菌DH5α中扩增；所述的PCR即为聚合酶链式反应，MOMP为沙眼衣原体主要外膜蛋白。