主权项 |
一种虎奶菇多糖的提取方法,其特征在于按照以下操作步骤:(1)将自然风干的虎奶菇进行粉碎并过筛,得到虎奶菇干燥粉末;(2)往虎奶菇干燥粉末中加入虎奶菇干燥粉末质量30~50倍的蒸馏水,在80~100℃下用输出功率为50~100W超声波萃取2~4h,离心5~20min,取上清液;离心后的虎奶菇固体残渣再加入其质量30~50倍的蒸馏水,重复上述超声波萃取操作3~5次,上清液合并,得到虎奶菇多糖提取液A;(3)利用旋转蒸发仪在80~100℃下对虎奶菇多糖提取液A进行浓缩2~4h,得到虎奶菇多糖提取液B;(4)将虎奶菇多糖提取液B的pH值调节至3~8,加入虎奶菇多糖提取液B质量0.5~2倍的木瓜蛋白酶,30~70℃下水解1~5h,沸水浴处理5~10min,得虎奶菇多糖提取液C;所述木瓜蛋白酶的活性为80000~100000U/g;(5)往虎奶菇多糖提取液C中加入占其体积1/3的Sevag试剂,充分抽提0.5~3h,离心5~20min,取上清液;上清液继续用其1/3体积的Sevag试剂进行脱蛋白,充分抽提0.5~3h,离心5~20min最终获得的上清液为虎奶菇多糖提取液D;(6)往虎奶菇多糖提取液D中加入占其体积3~5倍的乙醇,在0~25℃下醇析2~24h,离心10~20min,弃上清液并室温挥发干乙醇,得到多糖;再用多糖质量5~15倍的蒸馏水进行溶解,得到虎奶菇多糖提取液E;(7)利用超滤膜将虎奶菇多糖提取液E进行超滤,收集分子量10000道尔顿以上的组分,再进行Sephadex G‑100于25℃下进行柱层析得纯化多糖,收集多糖组分,冷冻干燥,得到虎奶菇多糖。 |