发明名称 |
重组人骨形态发生蛋白异源二聚体蛋白及高效表达和复性方法 |
摘要 |
本发明涉及一种重组人骨形态发生蛋白异源二聚体蛋白及高效表达和复性方法,方法包括以下步骤:利用融合PCR技术通过编码(GlyGlyGlyGlySer)<sub>3</sub>的DNA片段将BMP7和BMP2基因连接,将融合基因插入pHis-NusA质粒中,构建重组质粒,重组质粒导入大肠杆菌BL21(DE3)中,37℃培养,0.5mM IPTG诱导表达,结果表明此方法高效表达BMP7/BMP2异源二聚体蛋白,表达蛋白以包涵体形式存在,经过简便的包涵体纯化和复性即能得到大量复性蛋白,本方法获得BMP活性蛋白操作简单,极大地降低了制备成本,适合大规模发酵生产,为BMP在临床上治疗骨损伤的广泛应用提供了可能。 |
申请公布号 |
CN104277118A |
申请公布日期 |
2015.01.14 |
申请号 |
CN201410334579.5 |
申请日期 |
2014.07.14 |
申请人 |
天津科技大学 |
发明人 |
刁爱坡;党建利;李玉银;时威威;罗深恒 |
分类号 |
C07K19/00(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I;C12N15/62(2006.01)I |
主分类号 |
C07K19/00(2006.01)I |
代理机构 |
天津盛理知识产权代理有限公司 12209 |
代理人 |
赵瑶瑶 |
主权项 |
一种重组人骨形态发生蛋白异源二聚体蛋白,其特征在于:所述蛋白从N端到C端的顺序是BMP7‑连接肽‑BMP2,所述连接肽是由3个GlyGlyGlyGlySer重复氨基酸序列组成。 |
地址 |
300457 天津市滨海新区经济技术开发区十三大街29号 |