| 主权项 |
1.一种自动物乳汁中分离酪蛋白之方法,系包括将动物乳汁于10至20磅/平方英寸之流速压力与pH値5.0至6.5的条件下通过一滤膜孔径0.1至0.44微米之不带电荷过滤膜进行过滤,藉以分离乳汁中之酪蛋白。2.如申请专利范围第1项所述之方法,其中前述过滤膜为陶瓷过滤膜。3.如申请专利范围第1项所述之方法,其中前述陶瓷过滤膜之孔径系介于0.14微米至0.2微米之间。4.如申请专利范围第1项所述之方法,其中前述乳汁为全乳、去脂乳或乳清。5.如申请专利范围第1项所述之方法,其中前述过滤方式系为渗滤方式。6.如申请专利范围第1项所述之方法,其中前述pH値系根据欲纯化之标的蛋白质之物理特性或化学特性而决定。7.如申请专利范围第1项所述之方法,系在前述过滤方法之前加入一预处理步骤以去除乳脂。8.如申请专利范围第7项所述之方法,其中前述预处理步骤系包括一离心步骤。9.如申请专利范围第1项所述之方法,其中前述动物为未经基因转殖之动物或基因转殖动物。10.一种由动物乳汁中纯化标的物质之方法,系利用申请专利范围第1项至第8项之任一项所述之方法,以去除乳汁中之酪蛋白。11.如申请专利范围第10项所述之方法,其中前述之标的物质为胜或蛋白质。12.一种由动物乳汁中纯化标的物质之方法,系包括下列步骤:(a)将动物乳汁以缓冲溶液调至pH値5.0至6.5;(b)将(a)步骤所得之特定pH値之动物乳汁于10至20磅/平方英寸之流速压力下通过一滤膜孔径0.1至0.44微米之第一过滤膜,以分离乳汁中之酪蛋白并收集第一滤出液;以及(c)将前述第一滤出液于10至20磅/平方英寸之流速压力与pH値5.0至6.5之条件下通过一第二过滤膜,以浓缩标的物质并收集第二滤出液。13.如申请专利范围第12项所述之方法,系于步骤(c)之后进一步加入层析步骤以纯化出标的物质。14.如申请专利范围第12项或第13项所述之方法,其中前述标的物质为胜或蛋白质。15.如申请专利范围第14项所述之方法,其中前述蛋白质为人类第九凝血因子。16.如申请专利范围第12项所述之方法,其中前述第一过滤膜为陶瓷过滤膜。17.如申请专利范围第12项所述之方法,其中前述第一过滤膜之孔径系介于0.14微米至0.2微米之间。18.如申请专利范围第12项所述之方法,其中前述第二过滤膜为聚过滤膜。19.如申请专利范围第18项所述之方法,其中前述聚过滤膜之孔径为30kD。20.如申请专利范围第12项所述之方法,其中前述步骤(b)与步骤(c)为渗滤方式。21.如申请专利范围第13项所述之方法,其中前述层析步骤系为盐溶法(salt in)、盐析法(salt out)、胶体过滤法(gel filtration)、离子交换层析法(ion exchangechromatography)或亲和层析法(affinity chromatography)。22.如申请专利范围第12项所述之方法,系在步骤(a)之前加入一预处理步骤以去除乳脂。23.如申请专利范围第22项所述之方法,其中前述预处理步骤系包括一离心步骤。24.如申请专利范围第12项所述之方法,其中前述乳汁为全乳、去脂乳或乳清。25.如申请专利范围第12项所述之方法,其中前述动物为未经基因转殖之动物或基因转殖动物。26.一种自动物乳汁中纯化人类第九凝血因子之方法,至少包含下列步骤:(a)将动物乳汁以缓冲溶液调至pH値5.0至6.5;(b)将(a)步骤所得之pH値5.0至6.5之动物乳汁于10至20磅/平方英寸流速压力下通过一滤膜孔径0.1至0.44微米之陶瓷过滤膜,以分离乳汁中之酪蛋白并收集第一滤出液;以及(c)将前述第一滤出液于10至20磅/平方英寸流速压力与pH値5.0至6.5条件下通过聚过滤膜,以浓缩人类第九凝血因子并收集第二滤出液。27.如申请专利范围第26项所述之方法,系在步骤(a)之前加入一离心步骤以去除乳脂。28.如申请专利范围第26项所述之方法,系在步骤(c)之后加入层析步骤纯化出人类第九凝血因子。图式简单说明:第一图系显示利用本发明之方法纯化人类第九凝血因子之流程。第二图系显示使用本发明之方法分离酪蛋白之功效。第三图系显示利用本发明之方法分离酪蛋白后,于滤出液中仍保留大量人类第九凝血因子。第四图系显示纯化后所得到的人类第九凝血因子。 |
