一种用酿酒后葡萄籽制备低聚原花青素和单宁色素的方法

摘要

一种用酿酒后葡萄籽制备低聚原花青素和单宁色素的方法，涉及一种用酿酒后葡萄籽制备低聚原花青素和单宁色素的方法。本发明以酿酒后葡萄籽为原料，经破碎风选、提取原花青素、超滤分离、聚酰胺柱层析、制备低聚原花青素干粉、制备单宁色素的简单工艺，就制得高纯度低聚原花青素和单宁色素。本发明可应用于生产高纯度低聚原花青素以及单宁色素，采用本发明方法生产的低聚原花青素产品可广泛应用于保健品、药品和化妆品中，生产的单宁色素可用作葡萄酒的色素添加剂。

主权项

一种用酿酒后葡萄籽制备低聚原花青素和单宁色素的方法，其特征在于所述方法的具体步骤如下：(1)破碎风选将酿酒后的葡萄籽送入烘干机中，先在温度为60～85℃条件下干燥4～6小时，直至其中的水分含量降低至3～5％时，就获得干燥葡萄籽，接着将干燥酿酒后的葡萄籽用锤式粉碎机进行破碎，破碎完成后，收集破碎干燥酿酒后的葡萄籽，送入风选机中进行风选分离，分别收集葡萄籽仁、葡萄籽壳和未破碎干燥酿酒后的葡萄籽，对于收集的葡萄籽仁，用于提取葡萄籽油和葡萄籽蛋白，对于收集的葡萄籽壳，用于下一步提取原花青素，对于收集的未破碎干燥酿酒后的葡萄籽，再次送入锤式粉碎机进行破碎；(2)提取原花青素第(1)步完成后，将第(1)步收集的葡萄籽壳原料送入带冷凝器的提取罐中，按照葡萄籽壳原料的质量(g)∶体积分数为60％的乙醇水溶液体积(mL)比为1∶10～20的比例，将乙醇水溶液和葡萄籽壳依次加入提取罐中，密闭提取罐后再向提取罐夹层通入温度为45～65℃的热水，向冷凝器中泵入温度为5～15℃的冷凝水，在搅拌机转速为60～120r/min的条件下进行回流提取1～4h，提取完成后，趁热进行真空抽滤，分别收集真空滤过液和截留残渣，对于收集的真空滤过液，即为葡萄籽原花青素提取液，用于下一步进行超滤纯化处理，对收集的滤渣，按照葡萄籽壳的质量(g)∶体积分数为60％的乙醇水溶液的体积(mL)比为1∶5～8的比例，对收集的滤渣进行淋洗，分别收集淋洗液和淋洗截留残渣；(3)超滤分离第(2)步完成后，将第(2)步收集的葡萄籽原花青素提取液泵入真空浓缩罐中，在温度为70～80℃、真空度为0.05～0.09MPa下，进行减压蒸发浓缩，直至无乙醇味时止，分别收集蒸发冷凝液和脱除乙醇的浓缩液，对于蒸发冷凝液，含有乙醇，调节浓度后可再次使用，对于浓缩液，按照葡萄籽原花青素浓缩液与纯净水体积之比为1∶2～5的比例，将收集的葡萄籽原花青素浓缩液用纯净水稀释，搅拌均匀后泵入超滤器中，在0.05～0.2MPa的压力下用截留分子量为5000～10000Da的超滤膜进行超滤纯化，分别收集超滤滤过液和超滤截留液，对于收集的超滤截留液，即为含有大分子糖类和蛋白的溶液，泵入防爆型气流式喷雾干燥机中，在进风温度为90～110℃、出风温度为60～70℃、热风流速为5～10米/秒的条件下进行干燥，就制备出食用菌生产的营养添加剂，对于收集的滤过液，即为初步纯化的原花青素提取液，用于下一步进行聚酰胺分离；(4)聚酰胺分离第(3)步完成后，将第(3)步制备的初步纯化的原花青素提取液，泵入聚酰胺分离柱中，初步纯化的原花青素提取液∶聚酰胺树脂的体积比为1∶10～20的比例，将初步纯化的原花青素提取液以0.5～5倍聚酰胺树脂体积/小时的流速，泵入聚酰胺分离柱中进行吸附分离，分别收集荷载原花青素和单宁的聚酰胺分离柱和过柱流出液，对于收集的过柱流出液，用于回收乙醇，对于收集的荷载原花青素和单宁的聚酰胺分离柱，泵入1～5倍聚酰胺树脂体积的、体积分数为30％～45％的乙醇洗脱液进行第一次洗脱，直至第一次洗脱过柱流出液呈无色时止，所述乙醇洗脱液的泵入流速为1～5倍聚酰胺树脂体积/小时，分别收集第一次洗脱过柱液和第一次洗脱后的聚酰胺分离柱，对收集的第一次洗脱过柱液，用于制备低聚原花青素干粉，对收集的第一次洗脱后的聚酰胺分离柱，泵入1～5倍聚酰胺树脂体积的、体积分数为70％～80％的乙醇洗脱液进行第二次洗脱，直至第二次洗脱过柱流出液呈无色时止，所述乙醇洗脱液的泵入流速为1～5倍聚酰胺树脂体积/小时，分别收集第二次洗脱过柱液和第二次洗脱后的聚酰胺分离柱，对收集的第二次洗脱过柱液，用于制备单宁色素，对收集的第二次洗脱后的聚酰胺分离柱，泵入3～5倍聚酰胺树脂体积的纯净水进行洗涤，分别收集洗涤过柱液和洗涤后的聚酰胺分离柱；(5)制备低聚原花青素干粉第(4)步完成后，将第(4)步收集的第一次洗脱过柱液，用截留分子量为100Da～500Da的纳滤器进行纳滤浓缩，纳滤浓缩的压力为0.1MPa～0.5MPa，直至纳滤截留液∶纳滤滤过液的体积比为1∶4～9时止，分别收集纳滤滤过液和截留液，对于收集的纳滤截留液，即为低聚原花青素浓缩液，泵入防爆型气流式喷雾干燥机中，在进风温度为90～110℃、出风温度为60～70℃、热风流速为5～10米/秒的条件下进行干燥，收集干燥粉末，即为葡萄籽低聚原花青素干粉，获得的低聚原花青素干粉的纯度为82.2％～90.8％，总收得率为3.5～4.3％，对收集的纳滤滤过液，泵入真空浓缩器中，在0.05～0.08MPa的真空度和70～100℃的温度下进行真空浓缩，直至浓缩冷凝液无乙醇味为止，分别收集浓缩冷凝液和脱除乙醇后的浓缩液；(6)制备单宁色素第(5)步完成后将第(4)步收集的第二次洗脱过柱液泵入真空浓缩器中，在0.05～0.08MPa的真空度和70～100℃的温度下进行真空浓缩，直至浓缩冷凝液无乙醇味为止，分别收集浓缩冷凝液和脱除乙醇的浓缩液，对收集的脱除乙醇的浓缩液，泵入防爆型气流式喷雾干燥机中，在进风温度为100～130℃、出风温度为60～70℃、热风流速为5～10米/秒的条件下进行干燥，收集干燥粉末，即为单宁色素，获得的单宁色素干粉的纯度为87.5％～93.8％，总收得率为2.5～3.3％。