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L'invention concerne un procédé de traitement de signaux de fluorescence émis après excitation par un rayonnement provenant d'une source (8) de rayonnement, par au moins un fluorophore (22) à durée de vie tau dans un milieu environnant (20), ces signaux étant détectés par des moyens (4) de détection, ce procédé comportant le calcul, à partir de signaux détectés de fluorescence, des valeurs d'une variable, indépendante de tau, de la position ou de la répartition de fluorophore (22) dans ledit milieu (20).
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