一种提高诱导生成多能性干细胞效率的方法

摘要

本发明涉及一种提高诱导生成多能性干细胞效率的方法，尤其涉及用修饰组蛋白基因jhdm1a提高诱导生成多能性干细胞效率的方法。本发明利用Jhdm1a和干细胞诱导因子提高了诱导多能干细胞的效率，提高了诱导多能干细胞的质量。所述干细胞诱导因子为Oct4、Klf4的组合，或Sox2、Oct4和Klf4的组合，或Oct4和Sox2的组合，以及单独的Oct4等。本发明的方法还包括将所述细胞暴露于维生素C，其相比于不使用维生素C进一步提高了诱导多能干细胞的效率。本发明的方法通过使用较少的干细胞诱导因子降低了潜在的致癌性，同时获得了较高的诱导效率，并可以得到高质量的具有生殖系传递能力的诱导多能干细胞。

主权项

一种提高诱导生成多能性干细胞效率的方法，其特征在于，包括如下步骤：a、将包含转录因子的pMXs载体和包含Jhdm1a的pMXs载体转入哺乳动物的成体细胞，在诱导培养基中培养，诱导获得多能性干细胞克隆，所述哺乳动物的成体细胞为小鼠胚胎成纤维细胞，所述诱导培养基包括DMEM高糖培养基、15％的胎牛血清、0.1mM非必需氨基酸，2mML‑谷氨酰胺，1mM丙酮酸钠，55μMβ巯基乙醇，50U/mL青霉素，50μg/mL链霉素和1000U/ml白血病抑制因子，所述转录因子为Oct4、Klf4和Sox2的组合，所述Jhdm1a的基因序列如SEQ ID NO：1所示；b：将诱导获得的多能性干细胞克隆在干细胞培养基中培养扩增，所述干细胞培养基为步骤a所述诱导培养基。