发明名称 |
吉他霉素残留检测用基因工程抗体及制备方法和应用 |
摘要 |
本发明公开了一种吉他霉素残留检测用基因工程抗体及制备方法和应用,其步骤:A、取液氮保存的杂交瘤细胞株KA/2A9,提取脾细胞总RNA,得到mRNA,在逆转录得到cDNA。B、扩增得到重链可变区、轻链可变区基因;以重链和轻链抗体片段互为引物,利用多肽链将抗体重链和轻链连接;C、将酶切scFv连接入<i>E.coli</i>TG1中,加入M13K07培养,得到吉他霉素特异性抗体的噬菌体抗体文库。D、将噬菌体加入到处于对数生长期的<i>E.coli</i>HB2151中,IPTG诱导,得到特异性噬菌体抗体。E、验证的大肠杆菌表达菌株测序,得到单链抗体氨基酸和核苷酸序列。方法易行,操作简便,便于基因工程抗体的大批量生产。广泛应用于动物可食性组织中吉他霉素的残留检测,提供动物可食性组织中吉他霉素的残留量信息。 |
申请公布号 |
CN103288960B |
申请公布日期 |
2015.01.07 |
申请号 |
CN201210049798.X |
申请日期 |
2012.02.29 |
申请人 |
华中农业大学 |
发明人 |
袁宗辉;王小清;彭大鹏;王玉莲;黄玲利;陈冬梅;陶燕飞;戴梦红;刘振利;谢长清;蒋能辉 |
分类号 |
C07K16/44(2006.01)I;C12N15/13(2006.01)I;G01N33/543(2006.01)I |
主分类号 |
C07K16/44(2006.01)I |
代理机构 |
武汉宇晨专利事务所 42001 |
代理人 |
王敏锋 |
主权项 |
一种分离的基因工程单链抗体,其轻链可变区序列为SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列;其重链可变区序列为SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列。 |
地址 |
430070 湖北省武汉市洪山区狮子山街1号 |