一种基于微悬臂梁的检测杀虫晶体蛋白CrylAb的方法

摘要

本发明公开了一种基于微悬臂梁的检测杀虫晶体蛋白Cry1Ab的方法。本发明以11-巯基十一烷酸、6-巯基己酸或3-巯基丙酸作为巯基化试剂修饰到微悬臂梁的金膜上，以1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐（EDC·HCl）和N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）活化巯基化试剂的羧基，使之和杀虫晶体蛋白Cry1Ab抗体的氨基结合得到修饰有杀虫晶体蛋白Cry1Ab抗体的微悬臂梁。本发明将此修饰有Cry1Ab抗体的微悬臂梁用于杀虫晶体蛋白Cry1Ab的检测，取得了良好效果。此方法无需标记、操作简单、灵敏度高，可能用于替代现有的酶联免疫吸附检测方法，对转基因物种的分析检测具有十分重要的意义。

主权项

一种基于微悬臂梁的检测杀虫晶体蛋白Cry1Ab的方法，其特征在于，该方法包含以下步骤：将带金膜的微悬臂梁进行前处理，浸入巯基化试剂的醇类溶液中，清洗；将微悬臂梁浸入1‑乙基‑(3‑二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和N‑羟基琥珀酰亚胺的混合溶液中，清洗；将微悬臂梁浸入杀虫晶体蛋白Cry1Ab抗体的生物缓冲溶液中，避光条件下静置；在避光条件下，将上述修饰有Cry1Ab抗体的微悬臂梁用于对杀虫晶体蛋白Cry1Ab的检测；进一步地，所述1‑乙基‑(3‑二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐的浓度为10mg/ml～100mg/ml；所述N‑羟基琥珀酰亚胺的浓度为10mg/ml～100mg/ml；所述1‑乙基‑(3‑二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐和N‑羟基琥珀酰亚胺的体积比为1～5:1；所述浸入的反应时间为0.5h～4h。