一种发酵酶解法制备谷朊粉肽的工艺技术

摘要

本发明公开了一种发酵酶解法制备谷朊粉肽的工艺技术，利用微生物发酵酶法获得具有较高抗氧化活性的谷朊粉活性肽产品，以期为谷朊粉制备抗氧化肽的工业化生产提供技术支持，拓宽谷朊粉的应用范围，提高其生产附加值。本发明采用“超声波辅助酶解+好氧厌氧二步发酵工艺”到的谷朊粉肽产品色泽晶白，粉末状，无杂质，无苦味，总蛋白质含量≥97%，总蛋白质中分子量在1000道尔顿以下的肽含量≥98%；谷朊粉肽的还原能力达到0.486，ABTS自由基清除能力达到1.85mmol/LTrolox。本发明方法生产周期短，成本低，不产生任何有毒有害物质，所得产品安全性高、功能活性好，可广泛用于食品、药品、保健品和生物合成等领域。

主权项

一种发酵酶解法制备谷朊粉肽的工艺技术，其特征在于具体包括以下步骤：（1）预处理：按谷朊粉质量比3～5倍的比例向谷朊粉中加水，搅拌均匀；（2）加酶：按谷朊粉质量比1～2%、0.5～1%的比例分别加入木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶，调节pH7.0～8.0；（3）超声波辅助酶解：控制酶解温度40～50℃条件下，在超声波辅助作用下（400w,25kHz）,酶解30～60min；（4）液化：按谷朊粉质量比2～3‰的比例分别加入淀粉酶，调节pH6.0～7.0,60℃左右保温3～4h；（5）糖化：按谷朊粉质量比3～5‰的比例分别加入糖化酶，控制40℃左右水解1～2h；（6）配制培养基：向水解后的谷朊粉中加入3～5%（相对于谷朊粉质量比，下同）糖蜜、2～3%玉米浆、1.5～2%尿素、1～1.5%硫酸铵、0.1～0.2%磷酸二氢钾，调整初始pH为7.0左右；（7）灭菌：121℃灭菌30min；（8）产朊假丝酵母、酿酒酵母活化：将产朊假丝酵母、酿酒酵母分别接到YPD培养基中，30℃，180r/min转速下恒温摇瓶24小时；然后以1:100比例，将种子液接到YPD培养基中，得到酿酒酵母和产朊假丝酵母液体种子；（9）好氧发酵：将产朊假丝酵母、酿酒酵母按2～3%、1～2%(相对谷朊粉质量比)接种比例接种至培养基，28℃左右培养12～24h；（10）厌氧发酵：将固体乳酸菌粉按1～2%(相对谷朊粉质量比)的接种比例接种至培养基，26～30℃厌氧培养14h左右；（11）离心：发酵液离心得发酵上清液；（12）吸附：按谷朊粉质量的1～2%加入硅藻土，50～60℃搅拌吸附1～2h，过滤，除去硅藻土；（13）脱盐：采用膜分离技术进行脱盐；（14）浓缩：真空低压浓缩；（15）喷雾干燥：将浓缩液进行喷雾干燥得到产品谷朊粉肽。