一种海红豆悬浮细胞和再生植株的快速繁殖方法

摘要

本发明研究了一种海红豆悬浮细胞和再生植株的快速繁殖方法，包括外植体的消毒、愈伤组织的诱导、悬浮细胞的培养、胚性悬浮细胞的诱导、生根诱导等步骤，本发明方法建立了海红豆胚性细胞悬浮体系并获得了海红豆再生植株，不仅为其药用成分的开发和利用提供原料，亦可获得大量的海红豆再生植株，为其大规模栽培奠定基础。

主权项

一种海红豆悬浮细胞和再生植株的快速繁殖方法，包括外植体的消毒、愈伤组织的诱导、悬浮细胞的培养、胚性悬浮细胞的诱导、生根诱导，其主要步骤如下：（1）取海红豆的幼嫩叶片，进行消毒处理；（2）取步骤（1）消毒处理过的叶片接入MS+3‑4μmol/L生物素+0.3mg/LNAA+0.5‑1mg/L油菜素内酯培养基中进行愈伤组织诱导，附加7g/L琼脂，30g/L乳糖，温度25℃，暗培养；（3）取步骤（2）诱导出来的愈伤组织接入培养基MS+500‑600μmol/L谷氨酰胺+3‑4μmol/L生物素+2,4‑D 0.2mg/L中进行悬浮细胞培养，附加30g/L乳糖，温度25℃，暗培养，旋转摇床振荡，110r/min；（4）取步骤（3）培养的悬浮细胞接入培养基MS+CPPU0.3mg/L+NAA0.2mg/L+ZT0.5mg/L中进行胚性悬浮细胞诱导；（5）取步骤（4）诱导出来的胚性细胞接入不含任何激素的MD培养基中进行生根诱导，获得再生植株。