一种模式动物斑马鱼鱼苗评价药物急性毒性的方法

摘要

本发明的目的是提供易操作、快速、准确度高的一种用模式动物斑马鱼鱼苗评价药物毒性的方法。其特点在于：将药物以二甲亚砜或乙醇配成不同浓度的供试液，实验挑选受精后72小时发育正常的斑马鱼鱼苗，随机分配于多孔板，加入不同浓度的受试药物，并于受精后96小时在显微镜下观察。当鱼苗心脏停止跳动后，则判断死亡，计算各组斑马鱼鱼苗生存率并做统计。以GraphPad Prism软件拟合曲线计算半数致死量（LD50）值，以LD50值反应药物的急性毒性。该方法的有点在于：方法操作简单、快速、准确度高，能初步判断受试药物的急性毒性。

主权项

一种模式动物斑马鱼鱼苗评价药物急性毒性的方法，其特征在于该方法包括以下步骤：（1）将药物用二甲亚砜或乙醇配制成0.4~400μM的供试液；所述药物为紫杉醇或烟曲霉素或金诺芬中的一种或几种； （2）挑选受精72小时的发育正常的斑马鱼鱼苗，随机分配到多孔板中，每孔1‑100条，于0.1‑2ml培养液中，实验温度为28.5℃；所述培养液为鱼苗培养液，所述鱼苗培养液组成为：0.2g/L 的Instant ocean® sea salt；（3）在步骤（2）的多孔板中加入步骤（1）中的供试液，并且以含二甲亚砜或乙醇终浓度为0.1%‑0.4%的实验组作为对照，作用24小时后，即受精96小时，在显微镜下观察每孔中鱼苗的情况，以心脏停止跳动计为死亡；（4）计算各实验组斑马鱼鱼苗生存率，并作数据统计，GraphPad Prism 软件拟合曲线，并计算LD50值。