二茂铁多肽纳米线-葡萄糖氧化酶复合物及其制备和应用方法

摘要

本发明公开了一种二茂铁多肽纳米线-葡萄糖氧化酶复合物及其制备和应用方法。首次基于二茂铁-二苯丙氨酸自组装纳米线并结合葡萄糖氧化酶制备葡萄糖传感器。该葡萄糖传感器制备简单，在37℃，pH=7.4的人体生理条件下具有较高的灵敏度和较宽的线性范围，有望实现商品化。同时，该酶传感器制备方法可望拓展到其它电化学酶传感器的构建。

主权项

二茂铁多肽纳米线‑葡萄糖氧化酶复合物的制备方法，其特征在于，包括以下任一方式所述的步骤：称取二茂铁‑二苯丙氨酸溶于乙醇，配成2～5mg/mL的溶液；待溶剂挥发后，二茂铁‑二苯丙氨酸逐渐析出并且自组装形成线型纳米材料A；称取A2mg加入1mL蒸馏水，在超声仪中超声震荡3～5分钟，使A由团聚状态分散开来得到B；取1mL质量分数1％的壳聚糖溶液与B混合，震荡超声2分钟后放置3小时，使壳聚糖分子充分修饰到纳米线表面得到C；将C离心，离心转数为5000转/分钟，离心5分钟，移除上层溶液，然后重复进行两次加pH＝7.4的磷酸缓冲溶液、离心和移除上层溶液的过程后滴入500μL0.25％的戊二醛的水溶液，形成混合物后震荡半小时，然后离心得到D；按照二茂铁‑二苯丙氨酸2mg/mL的配比，向D中加入10～15mg/mL的葡萄糖氧化酶水溶液，震荡2‑5分钟，放置24h，即制成二茂铁多肽纳米线‑葡萄糖氧化酶复合物；或者称取2～5mg二茂铁‑二苯丙氨酸溶于1mL乙醇；将溶液烘干待二茂铁‑二苯丙氨酸析出及自组装形成线型纳米材料A；称取A2mg加入1mL磷酸缓冲溶液，在超声仪中超声3～5分钟，使A由团聚状态分散成单条纳米线状态，然后5000转/分钟，离心5分钟，再次加入1mL磷酸缓冲溶液，离心，移除上层溶液，得到E，分别取100μL0.5％质量分数的壳聚糖溶液，450μL0.25％戊二醛水溶液和450μL10‑15mg/mL的葡萄糖氧化酶水溶液，加入E中配成2mg/mL的二茂铁‑二苯丙氨酸溶液，震荡超声2～5分钟，放置24小时，即制成二茂铁多肽纳米线‑葡萄糖氧化酶复合物。