一种聚合物基材表面固定化酶的方法

摘要

本发明涉及一种聚合物基材表面固定化酶的方法,属于固定化酶制备技术领域。本发明分为以下步骤：第一步,在聚合物表面吸附光引发剂或共价连接光感应休眠基团；第二步,在可见光或紫外光照射下，光引发剂或休眠基团产生自由基，引发含有游离酶的单体溶液进行可控交联聚合反应，最终将酶固定在表面交联网络中。酶的固定化在可见光、低温或室温下进行，反应条件温和，有利于酶活性的保持。凝胶/基材复合结构提高了交联网络的机械强度，克服了凝胶网络易被破坏的缺点，不仅提高了酶的稳定性，也实现了酶的回收再利用。该方法既适用于单酶固定，也适用于复酶固定。

主权项

一种聚合物基材表面固定化酶的方法，其特征在于：将双向拉伸聚丙烯BOPP膜覆盖于低密度聚乙烯LDPE膜上方，取50μL异丙基硫杂蒽酮的浓度为0.5M丙酮溶液注入双层聚合物之间，然后用两片石英片将双层聚合物压实，异丙基硫杂蒽酮丙酮溶液均匀分布在双层聚合物之间，形成三明治结构，移入高压汞灯辐照装置，波长254nm处光强为9000μW/cm²中室温下照射180秒；将已引入能够继续引发自由基聚合休眠基的LDPE膜用丙酮抽提1小时，去除表面吸附的异丙基硫杂蒽酮，在室温下晾干；将聚乙二醇双丙烯酸酯，其分子量575，和葡萄糖酶共同溶于pH＝7.0的磷酸盐缓冲溶液中，其中聚乙二醇双丙烯酸酯的质量百分含量为20％，葡萄糖酶的质量百分含量为0.1％；取20μL的上述含酶溶液注入BOPP膜和接有休眠基的LDPE膜之间，其中BOPP膜位于三明治结构上方，然后用两片石英片压实，移入氙灯辐照装置，波长420nm处光强为2000μW/cm²，室温下照射1小时后取样；将得到的载酶复合膜用去离子水冲洗表面后冷冻干燥，4℃冰箱中保存。