单个多能干细胞培养

摘要

本发明涉及多能干细胞培养领域以及易于在工业水平培养多能干细胞的方法。本发明提供了用于已经用酶释放为单细胞的多能干细胞的维持、传代和分化的方法。尤其是，本发明提供了用于已经释放为单细胞的多能干细胞的维持、传代和分化，而没有随后的多能性损失，并且没有染色体异常增加的方法。

主权项

用于维持多能干细胞的方法，包括下列步骤：(a) 获得多能干细胞簇；(b) 在MEF条件培养基中培养所述多能干细胞簇；(c) 用酶释放该多能干细胞为单细胞；和(d) 平板接种该单个多能干细胞到组织培养基质上，所述组织培养基质包含细胞外基质以及bFGF或者成纤维细胞条件培养基；其中所述酶为丝氨酸蛋白酶；引起最少细胞损坏；并且以约0.5 g/l至2.5 g/l的浓度存在；其中所述酶用于培养细胞2分钟；并且其中在释放细胞后细胞成活力增强并且没有获得染色体异常。