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一种改进的动物组织基因组DNA提取方法，其特征在于它的溶液：氯仿、无水乙醇、Tris饱和酚、异戊醇、醋酸钠、饱和氯化钠、75%冰乙醇、裂解液、Tris‑HCl、EDTA、SDS和双蒸水；上述改进的动物组织基因组DNA提取方法包括以下步骤：（1）将组织样剪碎‑70℃保存（称取0.03g‑0.05g加入1.5ml离心管中）；（2）向组织块的离心管中加入900ul预冷TE,要防止组织块聚成团，尽可能制成细胞悬液；（3）3000r/min离心五分钟后弃上清液；（4）加入100ul饱和Nacl、400ul裂解液，混匀后至室温5min；（5）加入等体积的酚：氯仿：异戊醇(25:24:1体积比)，抽提一次，4℃13000rpm/min离心10min，用大口的移液管头（用剪刀将1ml移液管头口剪成大于3mm中的口）小心吸出上层水相（不可碰到蛋白质层），移至另一干净离心管中，尽量不要吸出两相的交界面；再用等体积的氯仿：异戊醇(24:1)，抽提一次，4℃13000rpm/min离心10min，用大口的移液管头（用剪刀将1ml移液管头口剪成大于3mm中的口）抽提至无蛋白沉淀产生；（6）用剪过头的移液管吸上清，加入1/10体积的3Mol/L的NaAc（PH=5.2），混匀后，再加入2倍体积的预冷的无水乙醇，冰浴10‑20min,13000rpm离心5分钟，弃上清液；（7）用50ul，70％冰乙醇漂洗1次，13000rpm离心5分钟，弃上清液，将离心管倒置于灭菌的滤纸上10‑15min使乙醇挥发，风干至无酒精味；（8）加入50ul TE,1%琼脂糖凝胶电泳检测（电泳或紫外分光光度法），‑20℃保存。 |
