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一种水貂巴氏杆菌病蜂胶灭活疫苗的制备方法，包括如下步骤：疫苗制备：选用于中国兽医药品监察所菌种室购买的一株多杀性巴氏杆菌C52‑17作为生产疫苗的菌株,复苏后接种血琼脂斜面培养基18小时，镜检无杂菌后作为种子液，以适量的菌种培养物接种血琼脂斜面经37℃培养18‑24小时，取培养菌液加入甲醛溶液，使其含甲醛的最终浓度为0.4%，37℃摇床灭活24小时；疫苗灭活检验：将甲醛灭活后的菌液取100微升接于3ml液体培养基中，一次培养取三次样，每个样品接种于三个试管中观察五天进行灭活安全检验，五天后接种的液体培养基仍澄清无混浊则安全检验合格；成品疫苗制备：按每ml疫苗含蜂胶干物质含量为8‑15mg标准添加蜂胶溶液搅拌15‑20分钟，使其充分混合乳化；采用三批蜂胶灭活疫苗进行免疫保护期测定：分为实验组和对照组，实验组分六组，每组30只水貂，用所述三批蜂胶灭活疫苗免疫，每批疫苗免疫10只水貂，每后肢内侧肌肉注射1mL；对照组分为六组，每组10只水貂，后肢内存肌肉注射生理盐水对1mL,免疫后的第1‑6个月，每月用巴氏杆菌分离毒株攻毒，测定疫苗对毒株的保护力，所述蜂胶灭活疫苗对水貂巴氏杆菌的保护期为6个月，免疫保护率在80%以上。 |
