液相色谱串联质谱快速测定乳与乳制品中三聚氰胺方法

摘要

本发明公开一种液相色谱串联质谱快速测定乳与乳制品中三聚氰胺方法，在待测的乳制品中加入内标，用乙腈提取三聚氰胺，使用正相色谱柱，用乙腈与乙酸铵缓冲盐溶液作为流动相反相分离三聚氰胺，再串联质谱MRM定性、定量分析乳与乳制品中三聚氰胺。国标法中使用SPE小柱进行净化，最终定容体积为1mL，本发明所述快速方法最终体积为25mL，所用曲线线性范围为0.25ng•mL^-1—5.00ng•mL^-1，乘以25倍的稀释差距后为6.25mg/kg—125mg/kg，已经完全达到并且满足了国标要求。在提高灵敏度的同时，降低了样品过载的可能。

主权项

一种液相色谱串联质谱快速测定乳与乳制品中三聚氰胺方法，其特征在于：在待测的乳或乳制品中加入内标，用乙腈提取三聚氰胺，使用正向色谱柱，用乙腈与乙酸铵缓冲盐溶液作为流动相反相分离三聚氰胺，再串联质谱MRM定性、定量分析乳或乳制品中三聚氰胺；所述的色谱柱以HELIC模式使用；流动相：4 mmol•L^‑1 乙酸胺水溶液和乙腈，其中乙酸胺水溶液与乙腈的体积比为1:9；流速：0.4 mL·min^‑1；柱温：40℃；进样量：2 μL；在此条件下，三聚氰胺及15N3内标物的保留时间为1.200 min；质谱条件是：电离方式为电喷雾离子化源，正离子模式；离子喷雾电压：4000 V；雾化气： GS1，N₂  50 psi；干燥气GS1，N₂ 流速：11 L·min^‑1，温度：350℃；碰撞气：氮气；扫描模式：多反应监测MRM；标准品的乳粉基质实验中，三聚氰胺选用在34 ev的碰撞能量下荷质比为m/z 68的子离子为定量离子，在14 ev 的碰撞能量下荷质比为m/z 85 的子离子为辅助定性离子；15N3内标物实验中，三聚氰胺选用在29 ev 的碰撞能量下荷质比为m/z 68的子离子为定量离子，在17 ev 的碰撞能量下荷质比为m/z 85 的子离子为辅助定性离子； 具体乳粉样品处理步骤为：1）称取 1 g的乳粉样品至 50 mL 的离心管中;2）加入 250 ng•mL^‑1 的三聚氰胺内标液 100 μL，加入 25 mL 的水：乙腈体积比为1:9的液体；3）涡流震荡 2 min，超声 30 min，不时摇动；4）取出，经 10000 r/min 离心 4 min；5）离心上清液经 0.22 μm 滤膜过滤。