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一种肠衣中多种大环内酯类兽药残留量的检测方法，其特征在于该方法包括以下的步骤：（1）样品提取：称取5 g肠衣样品置于50 mL具塞离心管中，加25 mL提取溶剂，涡旋，于4000 r/min离心3 min，将提取液收集于50mL容量瓶中，再加20 mL提取溶剂，重复上述操作，合并提取液，加提取溶剂定容至50 mL，精密量取10 mL提取液于20mL离心管中，在45℃以下水浴减压浓缩至近干，用10 mL缓冲溶液分次溶解残渣；（2）固相萃取柱净化将提取液转移过固相萃取柱，弃去流出液，用5 mL水和5 mL淋洗溶液依次洗涤离心管，洗涤液过C<sub>18</sub>柱，弃去流出液，负压抽干，用6 mL甲醇洗脱，收集全部洗脱液，在45℃以下水浴减压浓缩至近干，加2 mL样液溶解稀释液溶解，混匀，过0.22 µm 针筒滤膜，进行LC‑MS/MS分析；（3）液相色谱‑质谱/质谱仪测定按照色谱条件测定样品和标准溶液，质谱分离采用在正离子模式下进行母离子全扫描，再对其子离子进行全扫描，通过被测样品的质谱和相关信息，得到其定性和定量结果；定性时应当与浓度相当标准工作溶液的相对丰度一致，相对丰度允许偏差不超过规定的范围，则可判断样品中存在对应的被测物；定量测定时采用标准曲线法；步骤（3）中所述标准溶液的配置方法为：配置单个标准储备液时选用甲醇为溶剂，配置混合标准储备液时选用空白样品溶液稀释或定容；所述色谱分析条件为：液相色谱条件：色谱柱: ZORBAX Eclipse C<sub>8</sub>柱, 150mm×4.6 mmi.d ,5μm；流动相A:乙腈, 流动相B: 0.15%甲酸水溶液，梯度洗脱；流速: 400 μL/min；进样量:20μL；串联质谱条件：离子源:电喷雾离子源；扫描方式:正离子扫描；检测方式:多反应监测；电喷雾电压:4800 V；雾化气压力:42 psi；气帘气压力:25 psi；辅助气流速:45 psi；离子源温度:540 ℃；碰撞气:6 psi；分别设定母离子、子离子、去簇电压、碰撞室入口电压、碰撞室出口电压、碰撞气能量；所述梯度洗脱程序为：0～3.5分钟，流动相A30～70%，流动相B70～30%；3.5～8分钟，流动相A70%，流动相B30%；8～10分钟，流动相A70～30%，流动相B30～70%；10～16分钟，流动相A30%，流动相B70%；其中所述大环内酯类兽药包括螺旋霉素、替米考星、竹桃霉素、泰乐菌素、红霉素、罗红霉素、交沙霉素七种兽药至少一种。 |
