体液中乳糖测定方法

摘要

本发明公开了一种体液中乳糖测定方法，属于利用可见光，通过测试反应的结果产生颜色变化来测试材料的方法。本发明的技术方案是：工具酶及指示酶同在试剂I中，试剂II仅有乳糖酶有效成分；其测定方法为：体液中葡萄糖先与试剂Ⅰ于37℃温浴3～5分钟，体液中葡萄糖与试剂Ⅰ反应生成NADPH，加入试剂Ⅱ后于37℃温浴4～7分钟，乳糖水解后生成L-半乳糖和葡萄糖，葡萄糖经反应产生NADPH。仪器在334～340nm波长处检测，以试剂Ⅰ反应产生的NADPH为空白，由试剂Ⅱ反应产生的NADPH计算出乳糖的含量。本发明检测时不受内源性葡萄糖影响，其方法经济方便易行，不需要特殊检测设备，是一种准确性更高的乳糖检测方法。

主权项

一种体液中乳糖测定方法，其特征在于工具酶及指示酶同在试剂I中，试剂II中仅有乳糖酶有效成分；其测定方法为：体液中葡萄糖先与试剂Ⅰ于37℃温浴3～5分钟，体液中葡萄糖与试剂Ⅰ的反应生成NADPH，加入试剂Ⅱ后于37℃温浴4～7分钟，乳糖水解后生成L‑半乳糖和葡萄糖，葡萄糖经反应也生成NADPH；仪器在334～340nm波长处检测，以试剂Ⅰ反应产生的NADPH为空白，由试剂Ⅱ反应产生的NADPH计算出乳糖的含量，计算公式为：OD_乳糖 = OD₂ ‑ OD₁×[（SV+R₁V₁ ）/ (SV+R₁V₁ +R₂V₂)]乳糖浓度= F×OD_乳糖其中OD_乳糖是乳糖产生的吸光度，OD₁是样品加入试剂Ⅰ反应后测得的吸光度，OD₂反应液加入试剂Ⅱ反应后测得的吸光度，SV是样品的体积，R₁V₁是试剂Ⅰ的体积，R₂V₂是试剂Ⅱ的体积，F是校正因数。