一种卷烟滤嘴水浸提液体外微核试验阳性对照设置方法

摘要

本发明一种卷烟滤嘴水浸提液体外微核试验阳性对照设置方法，该方法为：1）选取相同数量的符合制备阳性对照条件的卷烟滤嘴和待测样品组卷烟滤嘴；2）配制浓度为200-400μg/ml的环磷酰胺水溶液；3）在用于制备阳性对照组的卷烟滤嘴上均匀喷洒环磷酰胺水溶液，待其自然干燥后备用；4）用相同的方法对阳性对照组和待测样品组卷烟滤嘴进行浸提；5）浸提液作为溶剂，用粉末细胞培养基进行配制，将配制后的溶液过滤除菌；6）对经步骤5）处理的提取液进行体外微核试验。通过该方法设置的阳性对照，可以验证卷烟滤嘴的提取过程和后续对卷烟滤嘴水浸提液进行的体外微核试验是否可靠。

主权项

一种卷烟滤嘴水浸提液体外微核试验阳性对照设置方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：步骤（1）选取相同数量的符合制备阳性对照条件的卷烟滤嘴和待测样品组卷烟滤嘴；步骤（2）配制浓度为200‑400 μg/ml的环磷酰胺水溶液；步骤（3）在用于制备阳性对照组的卷烟滤嘴上均匀喷洒步骤（2）配制的环磷酰胺水溶液，喷洒量应使环磷酰胺在滤嘴浸提试验测试体系中的理论完全溶出浓度大于等于20 μg/ml，并使卷烟滤嘴充分吸收环磷酰胺溶液，待其自然干燥后作为阳性对照组卷烟滤嘴备用；步骤（4）用相同的方法对步骤（3）制备的阳性对照组卷烟滤嘴和待测样品组卷烟滤嘴进行浸提；步骤（5）使用步骤（4）得到的水浸提液作为溶剂，用粉末细胞培养基按照培养基说明的方法进行配制，然后将配制后的溶液过滤除菌后用于后续的体外微核试验；步骤（6）用步骤（5）处理过的提取液进行体外微核试验，测试提取液在测试体系中的浓度为100%、50%、25%和12.5% 4个剂量，提取液的细胞暴露时间为24小时。