用于热启动逆转录反应或热启动逆转录聚合酶链式反应的组合物

摘要

本发明涉及一种用于热启动逆转录反应的组合物，和包括相同物质的用于逆转录PCR的组合物。更特别地涉及一种通过在单个反应管中向水溶液添加焦磷酸酯和焦磷酸酶而获得的反应组合物，所述水溶液含有反应缓冲液、MgCl₂、四种dNTP和逆转录聚合酶，以及一种通过冷冻或干燥所述反应组合物而获得的、并具有提高的稳定性和长期存放稳定性的用于热启动逆转录反应的组合物。并且，本发明涉及一种在用于热启动逆转录反应的组合物中包括DNA聚合酶的组合物，因而使得能够按顺序地进行热启动逆转录反应和PCR反应，同样的还涉及一种用于扩增核酸的方法。与传统的用于逆转录反应的组合物相比，用于热启动逆转录反应的组合物能够防止在室温下混合期间的非特异性逆转录反应，并能够在反应温度下选择性地进行靶RNA的逆转录反应，使得通过PCR高灵敏度地扩增逆转录产物成为可能。因而，本发明的组合物能够方便而有效地用于多重逆转录PCR或实时定量逆转录PCR。

主权项

一种用于热启动逆转录反应的组合物，包括Mg²⁺离子、四种dNTP、逆转录聚合酶、焦磷酸酯(PPi)和焦磷酸酶(PPase)。