鼠尾椎间盘体外三维胶立体培养方法

摘要

本发明公开了一种鼠尾椎间盘体外三维胶立体培养方法，用PBS配制浓度为2wt%的琼脂糖凝胶，与含10wt%FBS的DMEM培养液按体积比1：1混合形成三维培养胶；将从活体C57品系小鼠上剪切下来的鼠尾立即消毒并剥皮后投入PBS中清洗；在体视学显微镜下，剥除椎旁韧带显露椎间盘，沿上下软骨终板完整的切下椎间盘，用PBS清洗；将前述三维培养胶铺平培养皿，将椎间盘快速种植入三维培养胶内，待凝固后再加入含10wt%FBS的DMEM培养液覆盖表面，放入培养箱内，每天更换含10wt%FBS的DMEM培养液一次。本发明适用于椎间盘组织工程学，椎间盘移植术以及药物防治椎间盘退变等多方面的研究。

主权项

一种鼠尾椎间盘体外三维胶立体培养方法，其特征是，包括如下步骤：用磷酸盐缓冲液PBS配制浓度为2wt%的琼脂糖凝胶，与含10wt%胎牛血清FBS的细胞培养基DMEM培养液按体积比1：1混合形成三维培养胶；将从活体C57品系小鼠上剪切下来的鼠尾立即消毒并剥皮后投入PBS中清洗；在体视学显微镜下，剥除椎旁韧带显露椎间盘，沿上下软骨终板完整的切下椎间盘，用PBS清洗；将前述三维培养胶铺平培养皿，将椎间盘快速种植入三维培养胶内，待凝固后再加入含10wt%FBS的DMEM培养液覆盖表面，放入培养箱内，每天更换含10wt%FBS的DMEM培养液一次。