| 主权项 |
一种橙皮甙含量的测定方法，其特征在于包括以下步骤：（1）稀释溶液的制备：取20mmol/l的氢氧化钠溶液和50%甲醇溶液按0.5～1.5：1.5～0.5比例混合均匀；（2）萃取溶液的制备：取75mmol/l的氢氧化钠溶液和50%甲醇溶液按0.9～1.1：1.1～0.9比例混合均匀；（3）对照品溶液的制备：精密称取橙皮甙和柚皮甙对照品适量，加稀释溶液制成橙皮甙和柚皮甙浓度均为0.05mg/ml的对照品溶液；（4）供试品溶液的制备：精密称取550‑650mg样品于100ml容量瓶中，加入80ml萃取溶液，60～70℃超声提取10～20min，取出，冷却至室温后，用萃取溶液定容至刻度，取部分溶液用微孔滤膜过滤后备用；（5）确定色谱条件： 色谱柱：C18色谱柱，4.6mm×250mm，5μm；流动相A：0.1%三氟乙酸水溶液；流动相B：0.1%三氟乙酸的甲醇溶液与乙腈溶液按1：1混合；柱温：35℃；流速：1ml/min；进样量：20μl ； 检测波长：292nm；按流动相A：流动相B=90%～10%～90%：10%～90%～10%进行梯度洗脱，梯度洗脱时间为0min时，流动相A90%，流动相B10%；梯度洗脱时间为30min时，流动相A35%，流动相B65%；梯度洗脱时间为34min时，流动相A10%，流动相B90%；梯度洗脱时间为36min时，流动相A90%，流动相B10%；梯度洗脱时间为48min时，流动相A90%，流动相B10%；保留时间：柚皮甙为 17.6min 橙皮甙为 18.0min；（6）检测程序：分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，在规定条件下，每针运行时间应三倍于橙皮甙的保留时间；系统适应性条件：完全分离两种系统适应性物质，柱效应达到：理论塔板数大于2000，橙皮甙和柚皮甙的分离度大于1.5；通过测得数据计算橙皮甙含量 ：（A<sub>样</sub>×C<sub>对</sub>×100）/（A<sub>对</sub>×W<sub>样</sub> ） 式中：C<sub>对</sub>：橙皮甙标准工作溶液浓度mg/ml；A<sub>样</sub>：样品峰面积；A<sub>对</sub>：橙皮甙标准工作溶液峰面积平均值；W<sub>样</sub>：样品的质量mg。 |
