一种SPF小鼠病原菌核酸荧光定量PCR联合快速检测试剂盒及检测方法

摘要

本发明涉及一种SPF小鼠病原菌核酸荧光定量PCR联合快速检测试剂盒及检测方法。目的是提供的检测试剂盒应可同时对四种常见SPF动物携带病原进行检测；提供的方法具有操作简单、检测快速的特点。技术方案是：一种SPF小鼠病原菌核酸荧光定量PCR联合快速检测试剂盒，包括实时荧光定量PCR预混体系以及ddH₂O，该试剂盒还包括针对4种病原菌的4对特异性引物；特异性引物如下：金黄色葡萄球菌；肺炎克雷伯菌；沙门氏菌；绿脓杆菌。一种SPF小鼠病原菌核酸荧光定量PCR联合快速检测方法，按以下步骤进行：（1）提取样品DNA；（2）以样品DNA为模板，进行联合PCR检测；（3）反应产物置于定量PCR仪进行荧光检测。

主权项

一种SPF小鼠病原菌核酸荧光定量PCR联合快速检测试剂盒，包括实时荧光定量PCR预混体系以及ddH₂O；其特征在于该试剂盒还包括针对4种病原菌的4对特异性引物；所述特异性引物序列如下：沙门氏菌：上游引物‑FP:5’‑CAACGTATATCTGAAGTTTTGCAGC‑3’；下游引物‑RP:5’‑TAATGACATCTTTTTCTCTTGGCG‑3’；肺炎克雷伯菌：上游引物‑FP:5’‑ATGTCGATTTGGAGGTTGTGCCCTT‑3’；下游引物‑RP:5’‑CCCCCGTCAATTCATTTGAGTTTTA‑3’；金黄色葡萄球菌：上游引物‑FP:5’‑CGAAAGGGCAATACGCAAAGAGGTT‑3’；下游引物‑RP:5’‑TACGCCGTTATCTGTTTGTGATGCA‑3’；绿脓杆菌：上游引物‑FP:5’‑TCAAGCCCACGGTCATCAGCCATCG‑3’；下游引物‑RP:5’‑GCCGCACTGCTCCAGTTGTTCCCAG‑3’。