基于外切葡聚糖酶的工程菌及其实现方法

摘要

一种基因工程领域的基于外切葡聚糖酶的工程菌及其实现方法，以灰略红链霉菌基因组DNA为模板，与含有酶切位点和谷胱甘肽标签的引物进行PCR扩增得到编码外切葡聚糖酶的核苷酸序列；然后将扩增得到的基因序列连接到表达载体，再将获得的连接产物转入大肠杆菌表达菌株内，获得外切葡聚糖酶过表达重组菌株。本发明通过构建外源表达载体，优化蛋白诱导表达的条件和融合标签等方法，实现了外切葡聚糖酶的胞外过表达。

主权项

一种外切葡聚糖酶的工程菌，其特征在于，该工程菌为外源表达外切葡聚糖酶的大肠杆菌； 所述的胞内外切葡聚糖酶具体为灰略红链霉菌(Streptomyces griseorubens)JSD‐1外切葡聚糖酶基因SG‐CX，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，氨基酸序列如SEQ ID No.2所示，编码该外切葡聚糖酶核苷酸序列为1737bp，共编码578个氨基酸，其中信号肽切割位于N端第32个氨基酸与第33个氨基酸之间。