脂环酸芽孢杆菌的免疫磁性微球及其应用

摘要

本发明公开了一种脂环酸芽孢杆菌的免疫磁性微球及其应用，所公开的脂环酸芽孢杆菌的免疫磁性微球是用胺基化磁性微球包被氧化脂环酸芽孢杆菌特异性抗体而得到的；所述氧化脂环酸芽孢杆菌特异性抗体的制备方法包括：利用高碘酸钠的PBS溶液对脂环酸芽孢杆菌特异性抗体进行氧化处理，之后收集获得氧化脂环酸芽孢杆菌特异性抗体。利用上述公开的脂环酸芽孢杆菌的免疫磁性微球可对果汁尤其是苹果汁中的脂环酸芽孢杆菌进行有效分离。

主权项

脂环酸芽孢杆菌的免疫磁性微球的制备方法，其特征在于，用胺基化磁性微球包被氧化脂环酸芽孢杆菌特异性抗体得到脂环酸芽孢杆菌的免疫磁性微球；所述胺基化磁性微球的制备方法包括：（1）80‑90 ℃条件下，Fe₃O₄磁核在硅酸钠溶液中进行硅烷化反应制备硅烷化磁性微球；所述硅酸钠溶液的质量浓度为4%‑5%、PH大于11；所述的Fe₃O₄磁核的粒径为15‑25 nm、磁性的饱和磁化强度为40‑80 emu/g ；（2）调节硅烷化磁性微球的PH呈中性；（3） 80‑90 ℃条件下，将PH呈中性的硅烷化磁性微球、甲醇、3‑氨丙基三乙氧基硅烷、去离子水和甘油混合反应制备胺基化磁性微球；所述硅烷化磁性微球、甲醇、3‑氨丙基三乙氧基硅烷、去离子水和甘油的用量为：硅烷化磁性微球：        1‑2g/毫升甲醇：                   150体积，3‑氨丙基三乙氧基硅烷：   10体积，去离子水：               1体积，甘油：                   150‑161体积；所述的胺基化磁性微球的粒径为45‑55 nm、磁性的饱和磁化强为40‑60 emu/g；所述氧化脂环酸芽孢杆菌特异性抗体的制备方法包括：利用含高碘酸钠的PBS缓冲液对脂环酸芽孢杆菌特异性抗体进行氧化处理，之后采用Sephadex G‑25层析柱收集获得氧化脂环酸芽孢杆菌特异性抗体；所述含高碘酸钠的PBS缓冲液中高碘酸钠浓度为10 mg/mL， PBS缓冲液的浓度为0.1 mol/L、pH值为7.4；所述脂环酸芽孢杆菌特异性抗体的浓度为1 ‑3mg/mL；所述含高碘酸钠的PBS缓冲液与脂环酸芽孢杆菌特异性抗体的体积比为1‑3：1； 所述氧化脂环酸芽孢杆菌特异性抗体的浓度为1 ‑2 mg/毫升 ，且每毫升氧化脂环酸芽孢杆菌特异性抗体用20mg 的胺基化磁性微球包被； 利用封闭液封闭所述的脂环酸芽孢杆菌的免疫磁性微球，所述封闭液的组分量为：每100ml浓度为0.01 mol/L 的 PBS缓冲液中含有1‑10克 BSA和0.05 ml Tween‑20 。