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Verfahren zur Herstellung einer transfizierten Zelllinie umfassend Transfizieren mit Polynukleotiden und Kultivieren der transfizierten Zelle, wobei die Polynukleotide für die schweren und leichten Ketten eines humanisierten Immunglobulins kodieren, und wobei das humanisierte Immunglobulin eine humane Akzeptor-Rahmenregion und Kabat-komplementaritätsbestimmende Regionen (CDRs) von einem Donor-Immunglobulin aufweist und an ein Antigen bindet, und wobei das humanisierte Immunglobulin mindestens eine nicht-CDR-Aminosäure von der Rahmenregion der leichten Kette des Donor-Immunglobulins umfasst, die die korrespondierende Aminosäure in der Akzeptor-Rahmenregion an einer Position ersetzt, an der: (a) die Aminosäure in der Akzeptor-Rahmenregion für diese Position selten ist und die korrespondierende Aminosäure in der Donor-Rahmenregion für diese Position in humanen Immunglobulin-Sequenzen häufig ist; oder (b) die Aminosäure benachbart zu einer der CDRs ist; oder (c) für die Aminosäure ein Seitenkettenatom vorhergesagt wird, das fähig ist, mit den CDRs des humanisierten Immunglobulins zu interagieren. |
