一种microRNA原位杂交的冰冻切片的制备方法

摘要

本发明涉及一种microRNA原位杂交的冰冻切片的制备方法，包括：载玻片洁净处理，然后取洁净的载玻片，朝上面标记，滴加200ul浓度为0.1mg/ml多聚赖氨酸工作液；另取载玻片标记面向下，在注有溶液的载玻片上从一端相互反向将溶液推向另一端，直至标记处停止，平放，烘干，干燥后分开，得到防脱玻片；用冰冻切片包埋剂预先浸润组织表面，固定到切片托上，冷冻腔放置，待组织块至表面白色，全部冷冻后放入切片机冷冻夹上进行切片，即得。本发明中玻片易于标准化制作，操作简单，节约试剂，切片制作参数固定，特征明显，易于学。

主权项

一种microRNA原位杂交的冰冻切片的制备方法，包括：(1)将载玻片浸入水中，捞出后加入热的洗衣粉水溶液中，保持较高的洗衣粉水温度0.5h‑1h，然后冲洗，沥干，浸入乙醇中过夜，冲洗，进入重铬酸钾洗液中过夜，冲洗，洗涤，烘干，进行去除RNA酶的高温处理，得到洁净的载玻片；(2)取洁净的载玻片，朝上面标记，滴加多聚赖氨酸工作液；另取载玻片标记面向下，在注有溶液的载玻片上从一端相互反向将溶液推向另一端，直至标记处停止，平放，烘干，干燥后分开，得到防脱玻片；(3)预先用冰冻切片包埋剂浸润组织，固定到切片托上，冷冻腔放置，待组织块至表面白色，全部冷冻后放入切片机冷冻夹上进行切片，即得。