用于合成错误最小化核酸分子的材料和方法

摘要

本发明提供了可用于对核酸分子进行纠错的材料和方法。通过暴露于具有单向错配内切核酸酶活性的分子来使具有核苷酸错配的第一多个双链核酸分子片段化，留下在所述分子的末端或近末端具有错配的双链核酸分子。然后将所述核酸分子暴露于具有单向外切核酸酶活性的分子以去除所述错配核苷酸。然后通过例如具有DNA聚合酶活性的分子的作用填充所述缺失的核苷酸。结果是双链核酸分子的核苷酸错配频率降低。本发明还提供了编码错配内切核酸酶的新颖核酸序列、由此编码的多肽以及核酸构建体、转基因细胞及其各种组合物。

主权项

一种对核酸分子进行纠错的方法，所述方法包括：(a)获得包含至少一个核苷酸错配的第一多个双链核酸分子；(b)通过使具有错配的所述核酸分子与具有单向错配内切核酸酶活性的至少一种分子反应来使具有错配的所述多个双链核酸分子片段化；(c)通过使(b)的具有错配的所述片段化双链核酸分子与具有与(b)的所述单向错配内切核酸酶活性相同的方向性的单向外切核酸酶活性的至少一种分子反应来去除所述核苷酸错配，从而提供片段化无错双链核酸分子；和(d)组装包含(c)的所述片段化无错双链核酸分子的第二多个双链核酸分子，其中与所述第一多个双链核酸分子相比，所述第二多个双链核酸分子的核苷酸错配频率降低。