发明名称 |
禽流感病毒N9型RT-PCR检测试剂盒及检测方法 |
摘要 |
本发明涉及禽流感病毒N9型RT-PCR检测试剂盒及检测方法。目的是提供的检测试剂盒应具有使用方便、检测准确的特点,提供的方法应具有检测准确性高、检测简单方便的特点。技术方案是:一种禽流感病毒N9型的荧光定量RT-PCR检测试剂盒,包括脱氧三磷酸核苷、MgCl2、RT-PCR缓冲液、流感病毒N9基因标准品、RNA酶抑制剂、MMLV逆转录酶以及DNA聚合酶;其特征在于荧光定量RT-PCR检测试剂盒还包括上游引物、下游引物和特异性探针;一种禽流感病毒N9型的荧光定量RT-PCR检测方法,按以下步骤进行:(1)提取RNA;(2)进行RT-PCR反应;(3)对RT-PCR反应产物进行荧光检测。 |
申请公布号 |
CN103255233B |
申请公布日期 |
2014.12.17 |
申请号 |
CN201310176317.6 |
申请日期 |
2013.05.10 |
申请人 |
浙江省疾病预防控制中心 |
发明人 |
陈直平;张严峻;李辉 |
分类号 |
C12Q1/70(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I;G01N21/64(2006.01)I |
主分类号 |
C12Q1/70(2006.01)I |
代理机构 |
杭州九洲专利事务所有限公司 33101 |
代理人 |
王洪新 |
主权项 |
一种禽流感病毒N9型的荧光定量RT‑PCR检测试剂盒,包括脱氧三磷酸核苷、MgCl<sub>2</sub>、RT‑PCR缓冲液、禽流感病毒N9基因标准品、RNA酶抑制剂、MMLV逆转录酶以及DNA聚合酶;其特征在于所述荧光定量RT‑PCR检测试剂盒还包括上游引物、下游引物和特异性探针,所述上游引物、下游引物和特异性探针序列如下: 上游引物N9‑FP:5’‑ACAATACACGATAGRTCCCAGTA‑3’; 下游引物N9‑RP:5’‑CTAGTACTTGACCACCCAATGC‑3’; 特异性探针N9‑P:5’‑FAM‑CTRTCATCACCRCCCACAGTGTA‑BHQ1‑3’,其中FAM‑为荧光报告基团,BHQ1为荧光淬灭基团; 所述禽流感病毒N9基因标准品序列如下: GTTCTATGCTCTCAGCCAAGGAACAACAATCAGAGGGAAACACTCAAACGGAACAATACACGATAGGTCCCAGTATCGCGCCCTGATAAGCTGGCCACTATCATCACCGCCCACAGTGTACAATAGCAGGGTGGAATGCATTGGGTGGTCAAGTACTAGTTGCCATGATGG; 所述检测试剂盒中各组分的含量是: <img file="FDA0000515578540000011.GIF" wi="1473" he="1075" /><img file="FDA0000515578540000021.GIF" wi="890" he="82" />。 |
地址 |
310051 浙江省杭州市滨江区信诚路630号 |