一种柳叶剑蕨愈伤组织和悬浮细胞的快速繁殖方法

摘要

本发明研究了一种柳叶剑蕨愈伤组织和悬浮细胞的快速繁殖方法，包括无菌外植体的获得、愈伤组织的诱导、悬浮细胞培养、稀土调控悬浮细胞生长等步骤，本发明方法所制备的柳叶剑蕨悬浮细胞生长速度快，利用稀土对柳叶剑蕨悬浮细胞进行有目的调控，可以在短期内获得大量的制药原料，并能有效降低生产成本。

主权项

一种柳叶剑蕨愈伤组织和悬浮细胞的快速繁殖方法，包括无菌外植体的获得、愈伤组织的诱导、悬浮细胞培养、稀土调控悬浮细胞生长等，主要步骤如下：(1)取柳叶剑蕨的幼嫩叶片，按照常规的消毒方法对其进行灭菌处理；(2)将步骤(1)灭菌处理过的柳叶剑蕨叶片接入培养基配方为MS+NAA0.5mg/L+IBA4mg/l+4mg/L柠檬酸诱导培养基中进行愈伤组织诱导培养，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，PH5.8，暗室培养；(3)取步骤(2)诱导出来的愈伤组织放入液体培养基MS+2，4‑D0.1‑0.2mg/L+6‑BA0.1‑0.3mg/L进行悬浮细胞培养，附加蔗糖30g/L，PH5.8，光照2000lx；(4)取步骤（3）悬浮培养出来的细胞放入加入稀土的上述培养基中调控悬浮细胞生长。