发明名称 |
埃博拉五重荧光PCR快速超敏检测试剂盒及其应用 |
摘要 |
本发明提供了在单个PCR反应容器中五重检测核酸提取液中靶核酸的实时PCR方法,用于同时检测是否存在埃博拉-扎伊尔型(EBO-Zaire)、埃博拉-苏丹型(EBO-Sudan)、埃博拉-本迪布焦型(EBO-Bundibugyo)、埃博拉-塔伊森林型(EBO-Taiforest)和埃博拉-莱斯顿型(EBO-Restor)等埃博拉病毒亚型。该方法能有效避免假阴性和假阳性结果的产生,对于埃博拉病毒检测来说是非常有实际意义的。本发明还提供了用于实施上述方法的检测试剂盒及其应用等。 |
申请公布号 |
CN104212914A |
申请公布日期 |
2014.12.17 |
申请号 |
CN201410458684.X |
申请日期 |
2014.09.11 |
申请人 |
苏州华益美生物科技有限公司 |
发明人 |
刘劲林;郭志武;陈红干;张必新;王川;李振勇 |
分类号 |
C12Q1/70(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I;C12N15/11(2006.01)I |
主分类号 |
C12Q1/70(2006.01)I |
代理机构 |
北京万科园知识产权代理有限责任公司 11230 |
代理人 |
张亚军;夏新 |
主权项 |
在单个PCR反应容器中五重检测核酸提取液中靶核酸的实时PCR方法,所述靶核酸来自埃博拉‑扎伊尔型(EBO‑Zaire)、埃博拉‑苏丹型(EBO‑Sudan)、埃博拉‑本迪布焦型(EBO‑Bundibugyo)、埃博拉‑塔伊森林型(EBO‑Taiforest)和埃博拉‑莱斯顿型(EBO‑Restor),其包括:(1)在所述单个PCR反应容器中混合核酸提取液、DNA聚合酶、逆转录酶、RNA保护剂、dNTP、靶核酸引物对和靶核酸探针,其中所述探针标记有荧光基团和淬灭基团,而且各种探针标记的荧光基团的荧光检测波长互不相同,其中,靶核酸引物对包括GCCACTCACGGACAATGACA,GCATGCGAGGGCTGGTT,GGCAGCTCTTGGCTCACTTG,TGAGGAGACGTGCAAATGGA,ACCTCCGACGCGGTACAC,TGTGGGTGAACAGGAACATCA,GACCCGGATGATGGCAGAT,GGCATTCGCCGTCTCACTA,GCACCGAGGCCCAGAAC,和CTTCGTGCACTGGTGAGAGTCT,靶核酸探针包括:AAGAAATGAACCCTCCGGC,CAAGCATGGAGAATAT,CAAGACAGGCAACCTA,CAACAATTATGGAGACTATC,和TACGACCGCCAATCG;(2)进行PCR反应,并实时检测不同波长的荧光;和,(3)根据荧光检测结果判断是否有靶核酸存在于核酸提取液中。 |
地址 |
215434 江苏省苏州市太仓市浮桥镇富桥路1号 |