融合串联抗菌肽及其制备方法

摘要

融合串联抗菌肽及其制备方法，它涉及抗菌肽及其制备方法。本发明解决了现有抗菌肽合成方法中产量低，生产成本高；特别是采用基因工程重组表达抗菌肽过程中抗菌肽分子容易被酶解，导致表达量低或者很难表达的问题。融合串联抗菌肽由Fowlicidin-2、天蚕素B、Cecropin A(1-8)-Melittin(1-18)和死亡素四种抗菌肽串联而成。制备方法：一、设计cDNA片段；二、构建重组表达载体；三、获得转化子；四、诱导，收集上清液，蛋白纯化。本发明用于抗菌肽制备领域。

主权项

融合串联抗菌肽，其特征在于融合串联抗菌肽由Fowlicidin‑2、天蚕素B、Cecropin A(1‑8)‑Melittin(1‑18)和死亡素四种抗菌肽串联而成，Fowlicidin‑2、天蚕素B、Cecropin A(1‑8)‑Melittin(1‑18)与死亡素之间用GlySerGly联接；联接第一个和第二个原始小分子抗菌肽的GlySerGly的碱基序列为GGTTCTGGC；联接第二个和第三个原始小分子抗菌肽的GlySerGly的碱基序列为GGCTCCGGT；联接第三个和第四个原始小分子抗菌肽的GlySerGly的碱基序列为GGTTCTGGT；根据毕赤酵母密码子偏爱性设计Fowlicidin‑2、天蚕素B、CecropinA(1‑8)‑Melittin(1‑18)和死亡素的基因序列；其中，根据毕赤酵母密码子偏爱性设计的Fowlicidin‑2的基因序列为CTAGTTCAAAGGGGACGTTTTGGAAGATTTCTGAGAAAGATCCGAAGATTCAGACCAAAGGTTACAATCACTATTCAAGGTAGTGCTCGATTC；根据毕赤酵母密码子偏爱性设计的天蚕素B的基因序列为AAATGGAAAGTTTTTAAGAAGATTGAGAAAATGGGCAGGAACATTCGTAACGGAATCGTGAAGGCTGGGCCCGCAATTGCTGTGCTGGGTGAAGCTAAAGCCATATTATCA；根据毕赤酵母密码子偏爱性设计的Cecropin A(1‑8)‑Melittin(1‑18)的基因序列为AAATGGAAAGTTTTTAAGAAGATTGAGAAAATGGGCAGGAACATTCGTAACGGAATCGTGAAGGCTGGGCCCGCAATTGCTGTGCTGGGTGAAGCTAAAGCCATATTATCA；根据毕赤酵母密码子偏爱性设计的死亡素的基因序列为GGTTCTAAGAAACCAGTCCCCATCATATACTGCAATAGAAGAACGGGTAAGTGTCAGAGAATG。