一种凤梨柱头可授性的检测方法

摘要

本发明公开了一种凤梨柱头可授性的检测方法，属于植物的杂交育种技术领域。方法包括：(1)反应液的配制；(2)凤梨柱头的准备；(3)柱头吸光值A1与A2的测定；(4)柱头可授性A值的计算等步骤工艺。本发明与传统的联苯胺-过氧化氢法相比，通过表面活性剂加入前后吸光值的变化，可以量化判断出柱头酶活性强弱和柱头分泌物的多少，可更准确地判断出柱头可授性的强弱，较已有技术的目测判断，更客观而准确。

主权项

一种凤梨柱头可授性的检测方法，其特征在于按如下步骤进行：(1)反应液的配制：将德国产Peroxtesmo KO过氧化物酶试纸和蒸馏水按1片:1ml比例浸渍形成反应液或将1％联苯胺和3％过氧化氢及水按体积4∶11∶22比例配制成联苯胺‑过氧化氢反应液；按柱头体积大小将100‑200ul的反应液转移到离心管中，备用；(2)凤梨柱头的准备：将不同开花期的凤梨柱头，在距柱头20‑30mm处割断，备用；(3)柱头吸光值A1与A2的测定：将割断后的凤梨柱头按柱头朝下，倒置插入离心管中，至柱头浸入反应液中而花柱基部切口露于液面上，柱头在反应液中浸渍30s后，柱头的浸液部分和反应液显示出蓝色；对反应液采用紫外分光光度计658nm波长进行检测得吸光值A1；在反应液中加入0.02％‑0.05％的表面活性剂后，再次将柱头浸入该混合液中30S后，用同样设备、方法测得吸光值A2；(4)柱头可授性A值的计算：按公式A＝(A2‑A1)×2计算，得出柱头可授性0至5的A值，其中，当柱头可授性很强时，A值趋近或等于5；当柱头可授性很弱或几乎没有时，A值趋近或等于0。