一种基于表面增强拉曼光谱检测耳聋基因的方法

摘要

本发明公开了一种基于表面增强拉曼光谱检测耳聋基因的方法，以氢氟酸浸泡除杂后的单晶硅片，在其表面形成硅-氢键，加入硝酸银制得硅表面增强拉曼散射基底；将发夹DNA末端巯基与银纳米粒子共价形成Ag-S键，使发夹DNA共价连接到银纳米粒子修饰的硅片上，老化后，加入待检测耳聋致病基因序列充分杂交进行SERS检测；本发明采用发夹DNA辅助的SERS硅基底进行实体中耳聋致病基因的检测，有效提高了拉曼检测灵敏度，降低检测线，具有高特异性，重现性好。该检测方法操作简单，成本低，易于普及和传播。

主权项

一种基于表面增强拉曼光谱检测耳聋基因的方法，其特征在于，包括下述步骤：（1）将单晶硅片置于超声仪中依次用去离子水、丙酮、去离子水超声清洗，用浓硫酸和过氧化氢混合溶液清洗，用氢氟酸溶液浸泡硅片，将硅片平铺于反应器中，光面朝上，向其中迅速加入不同pH值的硝酸银溶液进行反应，得到表面修饰银纳米颗粒的硅片SERS基底；（2）将步骤（1）制备的硅片SERS基底与溶解于磷酸盐缓冲液的发夹DNA在恒温震荡仪上混合孵育，向溶液中分次加入氯化钠/磷酸盐溶液，过夜老化；（3）取出已组装发夹DNA的材料基底，用磷酸盐缓冲液洗涤多次，加入系列浓度的待检测耳聋致病基因序列于恒温振荡仪中进行充分杂交后，用磷酸盐缓冲液或者无菌去离子水冲洗表面，空气中自然晾干，进行SERS检测。