可可粉中活性成分的指纹图谱测定方法

摘要

本发明公开了一种可可粉中活性成分的指纹图谱测定方法。该测定方法以可可粉为原料，采用高效液相色谱法进行分析，以乙腈-0.05％磷酸缓冲盐溶液为洗脱体系进行梯度洗脱，通过高效液相色谱仪所得的供试品溶液的指纹图谱与可可粉标准指纹图谱经中药色谱指纹图谱相似度评价系统试验，应用指纹图谱特征对可可粉的质量进行全面控制，确保可可制品的质量与保健功效。本发明具有精密度高、稳定性好、重复性好的特点，能对可可粉活性成分进行有效分离并全面监控其质量。

主权项

一种可可粉中活性成分的指纹图谱测定方法，其特征在于，它包括以下步骤：(a)对照品溶液的制备：精密称取表儿茶素对照品，加入甲醇与水体积比为1:1的溶液溶解，制成每1mL含表儿茶素66μg的溶液，即得；(b)供试品溶液的制备：精密称取可可粉0.25～2.5g，加入甲醇与水体积比为1:1的溶液50～500mL，超声提取30～60min，过滤，取续滤液，即得；(c)设定色谱条件：用十八烷基硅烷键合硅胶为填料，流动相A为乙腈，流动相B为质量百分数为0.05％磷酸缓冲盐溶液；采用梯度洗脱方式，其洗脱程序为：0min→20min，流动相A为10％→15％、流动相B为90％→85％，20min→30min，流动相A为15％→30％、流动相B为85％→70％；检测波长210nm，流速为0.8mL/min，柱温30℃；理论塔板数按表儿茶素峰计，不低于6000；(d)标准指纹图谱的获得：精密吸取对照品溶液和供试品溶液10μL，按照设定的色谱条件，注入高效液相色谱仪，通过对照品表儿茶素的色谱峰，确定供试品溶液色谱图中的表儿茶素峰，按照色谱图方法学考察的方法得到可可粉的标准指纹图谱；(e)色谱分析：将每批次所得的供试品溶液的指纹图谱与可可粉标准指纹图谱经中药色谱指纹图谱相似度评价系统比较，来确定可可粉的质量。