一种道地药材川楝子的检测方法

摘要

本发明涉及一种道地药材川楝子的质量检测方法，属于医药技术领域。用以川楝素及多种苦味三萜成分如苦楝子酮、脂苦楝子醇，21-O-乙酰川楝子三醇，21-O-甲基川楝子五醇为指标，采用薄层色谱：TLC和高效液相色谱：HPLC分析方法，建立川楝子药材的质量检测方法；本发明在川楝子质量检测方法中，在进行ＴＬＣ检测同时，增加川楝素含量测定为指标，从而确保能采购到正宗的川楝子药材，确保其临床使用的有效性和安全性。

主权项

一种道地药材川楝子的检测方法，其特征在于：它包括如下检测步骤：用以川楝素为指标，采用薄层色谱：TLC和高效液相色谱：HPLC分析方法，建立川楝子药材的检测方法；A）、 TLC鉴别取待测粉末2ɡ，加水80ml，超声处理1小时，放冷，离心，取上清液，用二氯甲烷振摇提取3次，每次25 ml，合并二氯甲烷液，蒸干，残渣加甲醇2 ml使溶解，作为供试品溶液；另取川楝子对照药材2g，同法制成对照药材溶液，再取川楝素对照品，加甲醇制成每1 ml含1mg的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各10μl，分别点于同一硅胶Ｇ薄板上，以重量比为16：1的二氯甲烷－甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，喷以对二甲氨基苯甲醛试液，在105℃加热至斑点显色清新；供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同色的斑点；B）、含量测定　　照高效液相色谱－质谱法测定;　　色谱、质谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以重量比为31：69乙腈－0.01%甲酸溶液为流动相，采用单级四极杆质谱检测器，电喷雾离子化和负离子模式下选择质荷比573离子进行检测．理论板数按川楝素峰计算应不低于8000;对照品溶液制备：取川楝素对照品，加甲醇制成每1 ml含2μg的溶液．即得;供试品溶液制备：取待测品中粉0.25g，置具塞锥形瓶中，加入甲醇50 ml，称定重量，加热回流1小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液即得；测定法：分别精密吸取对照品溶液2μl，与供试品溶液1－2μl，注入液相－质谱联用仪，测定，以川楝素两个峰面积之和计算，即得；C）、线性关系考察 分别取川楝素、苦楝子酮、脂苦楝子醇，21‑O‑乙酰川楝子三醇，21‑O‑甲基川楝子五醇对照品溶液6、5、5、5、5ml，置于25 ml量瓶中，摇匀，加甲醇定容；吸取定容后的溶液 0.5、1.0、2.0、5.0、10.0ml，置10 ml量瓶中，摇匀，加甲醇定容，按上述色谱条件进样测定；D）、精密度试验 取混合对照品溶液适量，按上述色谱条件连续进样5次，记录峰面积;E）、稳定性试验 取同一供试品溶液适量，分别于0、2、4、8、12 h进样，记录峰面积;F）、重复性试验 取同批次样品适量，分别按B）、含量测定项下方法制备供试品溶液，照上述色谱条件进样，记录峰面积，计算样品含量；G）、加样回收率试验 取已知含量的样品约0.5 g，分别加入对照品溶液，按B）、含量测定项下方法制备供试品溶液，照上述色谱条件进样，记录峰面积，计算样品含量和加样回收率；H）、样品含量测定称取川楝子样品各适量，分别按B）、含量测定项下方法制备供试品溶液；各吸取10μl分别注入HPLC仪，照上述色谱条件测定峰面积，按外标一点法计算样品中川楝素成分的含量，检测结果得出。