主权项 |
一种小蓬竹快速繁殖方法,其特征在于,包括如下步骤:1)取的小蓬竹外植体,放在洗洁精水中浸泡2min,并不断摇动,然后放在流水下冲洗2‑3h,用滤纸吸干表面水分,然后,用70%乙醇浸泡30~40s,用无菌水冲洗数次,浸入0.1% HgCl<sub>2</sub>溶液中处理3~8min,用无菌水冲洗数次,无菌滤纸吸干表面水分;2)小蓬竹丛生芽诱导:将消毒后的小蓬竹外植体转接于培养基混合物中,25±1℃,光照3000 lx,14 h/d,诱导小蓬竹丛生芽,诱导时间持续20‑25d;其中,培养基混合物:MS基本培养基,6‑BA浓度为3~5mg/L,附加蔗糖30 g/L作为碳源,添加6.5 g/L琼脂作为凝固剂;用1mol/LNaOH和1mol/LHCl调节pH值为5.8;3)小蓬竹丛生芽增殖:将诱导出的丛生芽在超净工作台上切割成带有3‑5个芽的小块,经过分离后转接到增殖培养基混合物上,25±1℃,光照3000 lx,14h/d,进行增殖培养,增殖培养时间持续15‑30d;其中,增殖培养基混合物:MS基本培养基、生长调节剂6‑BA浓度3~5mg/L、KT浓度为0.5~1mg/L、蔗糖30 g/L,琼脂6.5 g/L混合而成;4)小蓬竹丛生芽生根培养:将增殖后的小蓬竹丛生芽,经过分离后转接到生根培养基混合物上,25±1℃,光照3000 lx,14h/d,进行生根培养,生根培养时间持续50d‑60d;其中,生根培养基混合物:MS基本培养基、蔗糖30 g/L,琼脂6.5 g/L、6‑BA浓度为1mg/L、NAA浓度为1~2mg/L、IBA浓度为0.5~1mg/L;5)小蓬竹组培苗移栽:将生根培养50‑60d后小蓬竹组培苗进行炼苗7d,用自来水将根系残留的培养基冲洗干净,栽于盛有基质的营养钵内。 |