一种NRAS基因突变检测特异性引物和液相芯片

摘要

本发明公开了一种NRAS基因检测特异性引物和液相芯片，该液相芯片主要包括有：每种由5’端的tag序列和3’端针对目的基因突变位点的特异性引物序列组成的ASPE引物，所述特异性引物序列为：针对Codon 12位点的SEQ ID NO.18以及SEQ ID NO.19、SEQ IDNO.20、SEQ ID NO.21、和/或SEQ ID NO.22；针对Codon 13位点的SEQ ID NO.23以及SEQID NO.24、SEQ ID NO.25、SEQ ID NO.26、和/或SEQ ID NO.27；针对Codon18位点的SEQID NO.28及SEQ ID NO.29；和/或针对Codon 61位点的SEQ ID NO.30以及SEQ ID NO.31、SEQ ID NO.32、SEQ ID NO.33、和/或SEQ ID NO.34；有anti-tag序列包被的微球；扩增引物。本发明所提供的检测液相芯片的检测结果与测序法的吻合率高达100％，实现多个突变位点的野生型和突变型并行检测。

主权项

一种NRAS基因突变检测液相芯片，其特征是，包括有：(A).针对NRAS基因不同突变位点分别设计的野生型和突变型的ASPE引物：每种ASPE引物由5’端的tag序列和3’端针对目的基因突变位点的特异性引物序列组成，所述特异性引物序列为：针对Codon12位点的SEQ ID NO.18以及SEQ ID NO.19、SEQ ID NO.20、SEQ ID NO.21和SEQ ID NO.22中的一种以上；针对Codon13位点的SEQ ID NO.23以及SEQ ID NO.24、SEQ ID NO.25、SEQ ID NO.26和SEQ ID NO.27中的一种以上；针对Codon18位点的SEQ ID NO.28和SEQ ID NO.29；和/或针对Codon61位点的SEQ ID NO.30以及SEQ ID NO.31、SEQ ID NO.32、SEQ ID NO.33和SEQ ID NO.34中的一种以上；所述tag序列选自SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.17；(B).有anti‑tag序列包被的、具有不同颜色编码的微球，所述anti‑tag序列与微球连接中间还设有间隔臂序列；所述anti‑tag序列选自SEQ ID NO.35～SEQ ID NO.51，且所述anti‑tag序列能相应地与(A)中所选的tag序列互补配对；(C).用于扩增出需要检测的、具有相应突变位点的目标序列的引物，所述扩增引物为：针对Codon12、Codon13、Codon18位点的SEQ ID NO.52和SEQ ID NO.53；和/或针对Codon61位点的SEQ ID NO.54和SEQ ID NO.55。