发明名称 检测或辅助检测II类细菌素产生菌群体感应信号肽的方法
摘要 本发明公开了一种检测或者辅助检测来源于II类细菌素产生菌代谢物的待检测肽是否含有或为II类细菌素产生菌群体感应信号肽的方法。本发明所提供的方法包括如下步骤:先将II类细菌素产生菌接种于液体改良脱脂乳培养基中培养,在到达稳定期之前这一时段中的任一时刻,向所述液体改良脱脂乳培养基中添加待检测肽,继续培养至10-16h,得到培养物;检测所述培养物中是否存在所述II类细菌素;若所述培养物中存在所述II类细菌素,则所述待检测肽含有或候选含有,或是或候选是所述II类细菌素产生菌的群体感应信号肽。本发明选用改良脱脂乳培养基可以甄别群体感应自诱导肽,且与脱脂乳培养基相比,更加快速,大大缩短了检测时间。
申请公布号 CN103173513B 申请公布日期 2014.12.10
申请号 CN201110431610.3 申请日期 2011.12.21
申请人 中国农业大学 发明人 李平兰;张香美;张宝;刘丽莎
分类号 C12Q1/02(2006.01)I 主分类号 C12Q1/02(2006.01)I
代理机构 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 代理人 关畅;任凤华
主权项 检测或者辅助检测来源于Ⅱ类细菌素产生菌代谢物的待检测肽是否含有II类细菌素产生菌群体感应信号肽或是否为II类细菌素产生菌群体感应信号肽的方法,包括如下步骤:先将Ⅱ类细菌素产生菌接种于液体改良脱脂乳培养基中培养,在到达稳定期之前的这一时间段中的任一时刻,向所述液体改良脱脂乳培养基中添加所述待检测肽,继续培养至10‑16h,得到培养物;检测所述培养物中是否存在所述Ⅱ类细菌素,按照如下方法确定所述待检测肽是否含有II类细菌素产生菌群体感应信号肽或是否为II类细菌素产生菌群体感应信号肽:若所述培养物中存在所述Ⅱ类细菌素,则所述待检测肽含有或候选含有II类细菌素产生菌群体感应信号肽,或所述待检测肽为或候选为II类细菌素产生菌群体感应信号肽;反之,则所述待检测肽不含有或候选不含有所述Ⅱ类细菌素产生菌的群体感应信号肽,或所述待检测肽不为或候选不为所述Ⅱ类细菌素产生菌的群体感应信号肽;所述Ⅱ类细菌素产生菌产生Ⅱ类细菌素受群体感应系统调控;所述待检测肽来源于将所述Ⅱ类细菌素产生菌在产生Ⅱ类细菌素状态下进行发酵得到的发酵上清液;所述改良脱脂乳培养基是在脱脂乳培养基中添加酵母浸粉得到的培养基,在所述改良脱脂乳培养基中,所述酵母浸粉、脱脂乳与水的配比为0.5g:(8‑12g):100ml;所述发酵上清液是按照包括如下步骤的方法获得的:将所述Ⅱ类细菌素产生菌以体积百分比0.5~1%的接种量接种于能使所述Ⅱ类细菌素产生菌产生Ⅱ类细菌素的MRS培养基中,30~37℃培养10~48h,至稳定期,收集得到所述发酵上清液;所述Ⅱ类细菌素产生菌为戊糖乳杆菌(Lactobacillus pentosus)31‑1。
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