一种鸡精液纯化的新方法

摘要

一种鸡精液纯化的新方法，通过加入改进的精子培养液(1份鸡血清加4份Earle氏液)，经19％percoll工作液分离，然后800rpm离心，恒温培养箱培养后可显著提高精子质量，通过利用精子密度与精液其他成分密度的差异及精子的直线运动的能力，达到纯化精液的目的。

主权项

一种鸡精液纯化的新方法，其特征在于：使用19％percoll工作液能有效分离精液中精子，具体步骤如下：(1)采用“按摩法”采集正常产精狼山鸡的精液200‑500ul，待液化后，即采集后半小时，加入3倍体积的精子培养液，混匀，800rpm离心，弃上清，所述精子培养液为1份鸡血清加4份Earle氏液；(2)将经所述精子培养液重悬沉淀后的精液，沿管壁缓慢加到2ml浓度为19％percoll工作液层上，所述19％percoll工作液置于5ml的指形管中，800rpm离心20min，弃上清，用手指轻弹管底，使沉淀松散；(3)沿管壁再向上述指形管中缓慢加入0.5ml精子培养液，放入37℃CO₂恒温培养箱中培养40min，精子在此期间会上游，吸取上游后的精子培养液，即可获得纯净的精液；纯化前后鸡精子质量比较，具体表现为：精子活率(％)、精子密度(亿/mL)、精子畸形率(％)、受精率(％)以及入孵蛋孵化率(％)在纯化前分别为：79.73±5.88、1.95±0.22、37.64±5.32、27.14±7.89、7.45±3.27；纯化后分别为：94.30±1.16^*、2.33±0.25^*、7.40±0.26^**、67.45±10.46^**、49.85±11.25^**，^*表示相同参数之间差异显著(P＜0.05)；^**表示差异极显著(P＜0.01)。