生物活性肽在原核细胞中的高效率重组表达和纯化方法

摘要

本发明公开了生物活性肽在原核细胞中的高效率重组表达和纯化方法，包括构建重组表达载体pHGB1-TEV、生长因子重组表达质粒pHGB1-TEV-hEGF、pHGB1-TEV-mEGF和pHGB1-TEV-LL-37并在大肠杆菌JM109菌株中高效表达和纯化抗菌肽LL-37及人和鼠表皮生长因子的技术。本发明采用现代生物技术，实现人表皮生长因子及抗菌肽的生产。通过这一体统表达的重组蛋白N端带有序列His₆-GB1-TEV，六个组氨酸标签便于重组蛋白通过Ni-NTA柱得到纯化，TEV酶切序列使得融合标签能被在TEV酶高效切除，从而得到目的生物活性肽。生物活性肽具有多种功能，具有巨大的市场需求，利用该技术重组表达和纯化生物活性肽具有产量高，活性高，工艺简单，生成成本低廉等优点，具有很高的工业开发价值。

主权项

一种重组质粒pHGB1‑TEV，其特征在于，所述质粒由原始质粒pET‑22b (+)和His₆‑GB1‑TEV  DNA编码序列组成。