发明名称 一种提取棉花干种子基因组DNA的方法
摘要 本发明提供了一种适用于棉花干种子基因组DNA快速提取的方法,包括步骤:1)取棉花干种子胚于200μL96孔PCR板中;2)向棉花干种子胚中加入DNA提取缓冲液,置于94℃15-20min;3)弃上清,重复步骤2)一遍;4)向棉花干种子胚中加入ddH<sub>2</sub>O稀释,即可用于PCR扩增分析。本发明方法从基因组DNA提取到SSR-PCR扩增,最后电泳,进行谱带分析,整个过程仅需4.5~5h。本发明提供的一种棉花干种子DNA快速提取方法,成本低、速度快、操作简单,适用于批量化DNA的提取,且整个提取过程无毒、无污染,是一种资源节约型和环境友好型的高效提取方法,适用于大批量样本的SSR分子标记鉴定工作。
申请公布号 CN103382470B 申请公布日期 2014.12.10
申请号 CN201310272540.0 申请日期 2013.07.01
申请人 湖北惠民农业科技有限公司;湖北省农业科学院粮食作物研究所 发明人 郎需勇;游艾青;别传述;刘立清;刘定富;刘伟霞;杨亮
分类号 C12N15/10(2006.01)I 主分类号 C12N15/10(2006.01)I
代理机构 武汉荆楚联合知识产权代理有限公司 42215 代理人 王健
主权项 一种提取棉花干种子基因组DNA的提取方法,其步骤如下:1) 取棉花干种子胚于200μL 96孔PCR板中;2) 向装有棉花干种子胚的PCR板的每个孔中加入50μL DNA提取缓冲液,然后于94℃保持 15~20min;3) 弃上清,重复步骤2)一遍得到棉花干种子基因组DNA原液;4) 向装有棉花干种子胚和提取缓冲液的PCR板的每个孔中加入150μL ddH<sub>2</sub>O稀释得到棉花干种子基因组DNA工作液;其中,步骤2)中的提取缓冲液:100mmol/L Tris,pH值8.0; 10mmol/L EDTA,pH值8.0;1mol/L KCl。
地址 430070 湖北省武汉市洪山区珞狮南路519号明泽丽湾2号楼19-20层