发明名称 同步检测草莓疫霉和树莓疫霉的三重PCR引物及其扩增方法和用途
摘要 本发明公开了一种同步检测莓类植物上两种检疫性疫霉的三重PCR引物及其扩增方法与用途,涉及3套引物,即疫霉属通用引物、草莓疫霉特异引物和树莓疫霉特异引物,其中通用引物用于菌丝基因组DNA的质量控制,建立三重PCR分子检测,经琼脂糖凝胶电泳观察,疫霉属菌株均应出现884bp的扩增片段,草莓疫霉还应出现615bp特异片段,树莓疫霉还应出现559bp特异片段,三套引物可有效用于两种疫霉的菌丝基因组DNA三重PCR特异扩增。
申请公布号 CN104195259A 申请公布日期 2014.12.10
申请号 CN201410472466.1 申请日期 2014.09.17
申请人 天津出入境检验检疫局动植物与食品检测中心 发明人 崔铁军;郭京泽;刘跃庭;罗加凤;朱林慧;李关荣;廖芳
分类号 C12Q1/68(2006.01)I;C12Q1/04(2006.01)I;C12R1/645(2006.01)N 主分类号 C12Q1/68(2006.01)I
代理机构 代理人
主权项 一种同步检测检疫性真菌病害草莓疫霉<i>P. fragariae</i>和树莓疫霉<i>P. fragariae. rubi</i>的三重PCR引物,实现了同时检测<i>P. fragariae</i>和<i>P. rubi</i>,引物序列如下:通用引物:18SUF:CGC GGT AAT TCC AGC TCC AAT A18SUR:AGA ACA TCT AAG GGC ATC ACA GAC C草莓疫霉特异引物:PFSF:TGT ATA TTT AAT ACG TAA TTA GCT CPFSR:AAT CTA TAT TGT TGT GAT AAA TG树莓疫霉特异引物:PRSF:ACT CCA TAA TAG ATA TAT ACG TGPRSR:AAC CAC TTA ATG GAA AG所述通用引物18SUF/18SUR扩增片段为884bp,作为DNA提取和扩增过程的质量控制;特异引物PFSF/PFSR扩增片段为615bp,PRSF/PRSR扩增片段为559bp,这三套特异引物用于草莓疫霉和树莓疫霉的菌丝基因组DNA特异三重PCR扩增。
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