一种改进的蛋白质测定方法

摘要

本发明提出了一种改进的蛋白质测定方法，包括以下步骤：（1）称取待测样品放入消化管中，向消化管中加入硫酸钾和硫酸铜，然后量取浓硫酸缓缓加入到消化管中，混合均匀后，在消化管瓶口放一小漏斗，放入消化炉中消化；（2）当消化管中内容物的颜色逐渐转化成透明的淡绿色时，取下消化管冷却后，向消化管中加入过氧化氢溶液将消化管管壁上粘有的碳化粒冲到消化管底部；（3）继续消化至呈透明为止，然后取下消化管，稍冷后将消化液小心移入100mL容量瓶中；（4）蒸馏、吸收和滴定。本发明提高了消化速度，缩短了测定时间，使企业不仅能快速获得产品蛋白质的指标，还可以节省大量检测试剂，提高了企业的经济效益。

主权项

一种改进的蛋白质测定方法，其特征在于包括以下步骤：（1）称取待测样品0.5000g放入消化管中，向消化管中加入4.5g硫酸钾和0.5g硫酸铜，然后量取10～12mL浓硫酸缓缓加入到消化管中，混合均匀后，在消化管瓶口放一小漏斗，放入消化炉中消化；（2）当消化管中内容物的颜色逐渐转化成透明的淡绿色时，取下消化管冷却后，向消化管中加入10mL 30％的过氧化氢溶液将消化管管壁上粘有的碳化粒冲到消化管底部；（3）将消化管再次放入消化炉中继续消化至呈透明为止，然后取下消化管，稍冷后将消化液小心移入100mL容量瓶中；（4）蒸馏吸取25mL消化液于定氮蒸馏器中，在其冷凝器的下端放置一个盛有5OmL硼酸溶液和3滴甲基红‑溟甲酚绿混合指示剂的25OmL锥形瓶，使冷凝器下端的玻璃管在锥形瓶内的液面以下；将10mL质量分数为40%的氢氧化钠溶液慢慢地加入蒸馏瓶中，迅速将塞子塞好，然后通入蒸汽进行蒸馏，蒸至液面达15OmL时，提出冷凝器下端的玻璃管，用蒸馏水冲洗冷凝管下端，将洗液一并聚集于硼酸溶液中，让玻璃管靠在锥形瓶的瓶壁，出液口在200mL刻度线以上，继续蒸馏，蒸至液位达200mL；（5）滴定用0.1mol/L的硫酸标准溶液滴定至溶液出现酒红色为止，记录所用硫酸标准溶液的体积；（6）计算结果X=(V一V0)×c(H^＋) ×2×0.014×F×100/m式中:X—蛋白质含量，g/100g；V—滴定时消耗硫酸标准溶液的体积，mL；Vo—空白试验消耗硫酸标准溶液的体积，mL；c(H^＋)—硫酸标准溶液中H十的浓度，mol/L；m—样品的质量，g；0.014—氮原子的摩尔质量，kg/mol；F—氮换算为蛋白质的系数，乳粉为6.38 ，纯谷物类(配方)食品为5.90，含乳婴幼儿谷物(配方)食品为6.25。