| 发明名称 |
一株L-瓜氨酸合成菌的构建及其应用方法 |
| 摘要 |
本发明敲除钝齿棒杆菌(<i>Corynebacterium</i> <i>crenatum</i>)SYPA5-5中编码精胺琥珀酸合成酶(Argininosuccinate synthase，ASS)的<i>arg</i>G基因，对获得的重组菌株进行发酵产L-瓜氨酸的研究，属于生物技术领域。首先，构建<i>arg</i>G基因内缺失片段(△<i>arg</i>G)，连接至pK18mob<i>sac</i>B中获得重组质粒pK18mob<i>sac</i>B△<i>arg</i>G，将其电转入SYPA5-5中，经两次同源重组，筛选获得重组菌株SYPA5-5△<i>arg</i>G。其次，考察不同浓度L-精氨酸对重组菌株生长及发酵产L-瓜氨酸的影响，发现添加L-精氨酸有利于菌体生长但不利于L-瓜氨酸积累。在不添加L-精氨酸条件下，重组菌株利用糖质原料，发酵96h，可积累15.2g/LL-瓜氨酸，糖酸转化效率为0.15g(L-citrulline)/g(glucose)。 |
| 申请公布号 |
CN104195162A |
申请公布日期 |
2014.12.10 |
| 申请号 |
CN201410191483.8 |
申请日期 |
2014.05.08 |
| 申请人 |
江南大学 |
发明人 |
许正宏;窦文芳;史劲松;赵芹芹;罗玉常;张晓梅;耿燕;吴珊珊 |
| 分类号 |
C12N15/77(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I;C12P13/10(2006.01)I;C12R1/15(2006.01)N |
主分类号 |
C12N15/77(2006.01)I |
| 代理机构 |
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代理人 |
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| 主权项 |
构建一株利用糖质原料发酵大量积累L‑瓜氨酸菌株的方法，其特征为，出发菌株分类命名为钝齿棒杆菌(<i>Corynebacterium crenatum</i>) SYPA5‑5∆<i>arg</i>G，已保存于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，菌株保存号为CGMCC No.8636，保存日期为2013年12月25日。 |
| 地址 |
214122 江苏省无锡市滨湖区蠡湖大道1800号 |
